两株盐碱地土壤链霉菌的鉴定及防病促生功能的研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:wofucyou4444
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近年来,新型抗生素的发现速度变得缓慢,越来越多的病原菌在已知抗生素频繁作用下已经产生了“耐药性”,急需发现新构型、新功能的活性化合物。常规生态环境限制了人们发现新菌种和新构型抗生素型化合物的脚步,极端环境作为一种微生物分离的新型高效的分离源已引起人们的广泛关注。盐碱地作为极端环境的一种,具有pH普遍偏高,可溶性盐含量在1-2%左右的特性,盐碱地土壤环境中的微生物种群大多具有耐盐碱的性质以及产生一些特殊的生理机制和功能。本研究主要对黑龙江省杜尔伯特地区盐碱化土壤中的放线菌进行分离,并对所分离放线菌的抗菌活性及植物促生的活性进行检测,不仅为新菌种的扩充和新型抗生素的获取提供宝贵的资源,也为盐碱环境的开发和改良打下坚实基础。研究的主要结果如下:(1)对杜尔伯特蒙古自治县地区的盐碱化土壤中的放线菌进行分离,利用四种分离培养基共分离并纯化得到43株放线菌,通过菌落形态对比发现其中大多数菌株属于链霉菌属。(2)对43株放线菌进行抗真菌活性初筛,共得到7株具有广谱抗菌活性的菌株,其中链霉菌2SGS2具有极强的抗真菌活性,对大豆菌核和大豆疫霉的抗菌活性均可达到90%以上,对其它8种植物病原真菌的平均抑菌率也能达到50-60%左右,而且发酵液对枯草芽孢杆菌有较强的抑菌活性,抑菌直径D=21mm,由于链霉菌2SGS2对大豆植株相关的病原真菌均具有较强的抗菌活性,故选择链霉菌2SGS2对大豆植株的离体叶片和苗期植株抗病性分别进行试验。(3)离体大豆叶片试验表明,链霉菌2SGS2对离体大豆叶片的染病情况有减弱作用,在孢子稀释液浓度为1.0×10~8 cfu/mL时,对离体大豆叶片的病情指数减弱作用最显著;盆栽试验表明,该菌株对大豆幼苗的发病率和病情指数等均存在明显的抑制作用。当孢子稀释液浓度达到1.0×10~7 cfu/mL时,对大豆菌核病的发病情况抑制效果最明显,且对大豆幼苗的株高等生理指标存在不同程度的促进作用。此外,平板催芽和盆栽试验显示,链霉菌2SGS2的孢子稀释液对小麦、玉米等植物均具有不同程度的促生长作用。通过对植物的株高、地上部分鲜重、地上部分干重、根长、根鲜重和根干重等指标的测试,结果显示,在孢子稀释液浓度为1.0×10~7 cfu/mL时,对玉米地上部分鲜重和小麦株高的促进作用最为明显,与对照组相比,其值分别了提高33.72%和18.33%。(4)对菌株NEAU-S1GS20进行16S rRNA测序,结果显示该菌株与链霉菌Streptomyces xinghaiensis S187~T具有98.41%的相似性,有可能为链霉菌属的一个新种。对该菌株采用多相分类学方法进行系统分类学鉴定,结果显示菌株NEAU-S1GS20在系统进化树中与Streptomyces xinghaiensis S187~T形成稳定的分支,但它们在培养形态特征观察、生理生化指标对比、化学成分分析等多个方面均存在显著差异,DNA同源性结果显示,菌株NEAU-S1GS20与相似菌株的同源性小于70%,故可以确定NEAU-S1GS20属于链霉菌属的一个新种,并将其命名为Streptomyces durbertensis。
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