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[目 的]蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage,SAH)后脑血管痉挛,脑血流量(Cerebral blood flow,CBF)下降,是SAH预后不良的病理基础,M4 型瞬时受体电位(Transient receptor potential melastatin-4,TRPM4)通道在维持脑动脉肌源性紧张度以及调节CBF的变化中起着至关重要的作用。然而,其作用机制目前仍不清楚。本研究探讨大鼠SAH模型对TRPM4的诱导作用,及TRPM4对SAH后CBF下降的作用。[方 法]120只清洁级SD大鼠随机分为体外实验组(48只)及体内实验组(72只),体外实验组分为sham组(24只)及SAH组(24只),各实验组下设3、5、7天三个时间点亚组(8只/组);体内实验组又分为sham组(18只),SAH 组(18 只),sham+9-phenanthrol(9-Phe,TRPM4 特异性阻滞剂)组(18只)及SAH+9-Phe组(18只),同样,各实验组下设3、5、7天三个时间点亚组(6只/组)。采用立体定向仪向大鼠鞍上池注入鼠尾自体动脉血0.2 mL建立SAH模型。通过置入式微量泵分别向sham组和SAH组大鼠侧脑室持续泵入生理盐水,向sham+9-Phe和SAH+9-Phe组大鼠侧脑室持续泵入浓度为0.03 mmol/L的9-Phe,SAH模型建立后3、5、7天,分离体外实验组大鼠脑动脉平滑肌细胞,通过免疫荧光和免疫印迹法检测TRPM4在脑动脉平滑肌细胞中的表达和转位。通过全细胞膜片钳技术测定脑动脉平滑肌细胞中TRPM4电流,通过加压肌动扫描检测脑动脉肌源性紧张度。通过激光多普勒和荧光微球法分别测量体内实验组大鼠皮层和全脑血流量。[结 果]Sham组和SAH组大鼠脑动脉平滑肌细胞中都观察到了 TRPM4表达。SAH后3、5、7天,SAH组大鼠TRPM4蛋白的表达丰度明显高于sham组(31.1±2.3%比 21.2 ± 1.4%,P<0.01;32.9 ± 4.5%比 23.2±2.7%,P<0.01;32.1±2.5%比 23.1±1.9%,P<0.01);SAH 组大鼠 TRPM4转位率明显高于 sham组(61.4±3.0%比31.4 ± 2.5%,P<0.01;64.8 ± 4.0%比 44.3±2.4%,P<0.01;63.9±3.6%比 43.2±2.6%,P<0.01)。钳制电压为-80 mV到+50 mV时,SAH组大鼠脑动脉平滑肌细胞所测TRPM4电流强度均大于sham组(P<0.01)。使用9-Phe后,TRPM4电流被明显抑制。SAH组大鼠脑动脉肌源性紧张度明显高于sham组(46.9 ± 1.8%比40.4±1.5%,P<0.05;46.4±1.6%比 40.1 ± 1.8%,P<0.05;44.4±1.2 比 40.1 ±1.9%,P<0.05),加入 9-Phe 后,SAH 组(15.2±1.6 比 46.9±1.8,P<0.01;16.0±1.2 比 46.4±1.6,P<0.01;16.2±1.8 比 44.4±1.2,P<0.01)及sham组大鼠脑动脉肌源性紧张度明显下降(15.8±1.3%比40.4 ±1.5%,P<0.01;16.0±1.2%比 40.1±1.8%,P<0.05;16.6±1.5%比40.1±1.9%,P<0.01),其中,SAH组大鼠脑动脉肌源性紧张度的下降明显高于 sham 组(31.7±1.8%比 24.6±1.5,P<0.01;30.5±1.6%比 24.1 ±1.8%,P<0.01;28.2±1.2%比 23.5 ± 1.9%,P<0.01)。SAH 后 3、5、7天,SAH组大鼠局部皮层血流量较sham组下降(100.6±16.0 PU 比 209.1 ±15.4PU,P<0.01;90.5±15.8PU 比 213.1±16.1PU,P<0.01;98.4 ±16.7 PU 比 210.1±15.9 PU,P<0.01),在使用9-Phe后,各组大鼠脑皮层血流量回升明显,其中SAH+9-Phe组大鼠大脑局部皮质脑血流量较SAH组明显增加(235.9±15.7 PU 比 100.6±16.0 PU,P<0.01;239.9±15.7 PU比 90.5±15.8PU,P<0.01;231.5 ± 15.0PU 比98.4±16.7PU,P<0.01),sham+9-Phe组大脑皮层血流量较sham组明显增加(259.9±13.7 PU 比 209.1 ±15.4 PU,P<0.01;263.2±12.7 PU 比 213.1±16.1 PU,P<0.01;260.9±13.0 PU 比 210.1±16.0 PU,P<0.01);SAH 组大鼠全脑血流量较 sham组下降(73.3 ± 5.4 ml·100g-1 min-1 比 125.2±12.1 ml·100g-1·min-1,P<0.01;61.2 ± 6.3 ml·100g-1·min-1 比 130.7±8.5ml·100g-1·min-1,P<0.01;70.8±6.0 ml 100g-1·min-1比127.1±8.0 ml·100g-1·min-1,P<0.01),在使用 9-Phe后,各组大鼠全脑血流量回升明显,其中SAH+9-Phe组大鼠大脑全脑血流量较SAH组明显增加(151.5±10.0 ml.100g-1·min-1 比 73.3±5.4 ml·100g-1·min-1,P<0.01;157.3±9.8 ml·1OOg-1·min-1 比 672±6.3 ml·100g-1·min-1,P<0.01;153.2±5.4 ml·1OOg-1·min-1 比 70.8 ± 6.0 ml·100g-1·min-1,P<0.01),sham+9-Phe组大鼠大脑全脑血流量较sham组明显增加(166.7±9.1 ml·100g-1·min-1比125.2±12.1 ml·1OOg-1·min-1,P<0.01;168.2±10.9 ml·100g-1.min-1 比 130.7± 8.5 ml·100g-1·min-1,P<0.01;169.0±8.2 ml·100g-1·min-1 比 127.1±8.0 ml·1OOg-1·min-1,P<0.01)。[结 论]SAH对TRPM4活性具有诱导作用,TRPM4活性的增加导致SAH后CBF减少。