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目的:腹部手术后,常出现术后胃肠功能障碍,导致一系列的临床症状。在促进术后胃肠功能恢复的临床研究中,大量的临床研究表明针刺能减轻术后胃肠功能障碍的程度,促进胃肠功能恢复,目前在临床上广泛应用。通过前期研究发现,术后胃肠功能的恢复可能与胃肠道ICCs修复再生存在密切的联系。CO气体信号通路是ICCs修复再生过程中一条重要的途径,CO是介导胃肠道平滑肌舒张的抑制性神经递质,当神经元受刺激时,HO合成CO并释放,介导神经传导。本课题通过观察针刺“靳三针”穴组中“足三针”对结肠吻合术后SD大鼠胃肠道CO气体信号通路的影响,探索针刺“足三针”对术后胃肠功能障碍SD大鼠胃肠功能恢复的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为3组:正常组、模型组、针刺组,模型组及针刺组再按干预时间的不同分为3天组、5天组、10天组。模型组:行结肠吻合术造模。麻醉后沿腹白线于中下腹部切开腹部,与盲肠下端2cm处剪短,缝合结肠,依次缝合腹膜、肌层和皮肤,术后不予针刺。针刺组:造模同模型组,术后按干预时间不同予以针刺干预。小肠推进率的测量:SD大鼠取材前,用灌胃器抽取lml墨水对大鼠进行灌胃,灌胃30min后颈椎脱臼处死,用组织剪剪开腹部,充分暴露肠道,仔细剥离大肠、小肠,量取小肠全长及幽门至墨水远端的距离。参照公式:小肠推进率=(墨水行进长度/小肠总长度)×100%,计算每只大鼠的小肠推进率。CO、HO-1、HO-2含量的测定:将SD大鼠脱臼处死后,截取盲肠下端吻合口约lcm长,将肠组织清洗干净,沿纵轴分为三部分,分别用于检测H0-1、HO-2、C0和电镜观察;按照不同的标本处理方法将肠组织做前期处理。使用ELISA法测定HO-1、HO-2活性,生化法测定C0含量;使用电镜观察Cajal细胞的超微结构。结果:1.小肠推进率测定结果:比较各组大鼠小肠推进率,正常组与5天针刺组、10天针刺无统计学意义(P>0.05),3天模型组与5天模型组无统计学差异(P>0.05),3天针刺组与10天模型组无统计学差异(P>0.05),5天模型组与10天模型组有统计学差异(P<0.05),其余各组相比较均有显著统计学意义(P<0.01)。2.HO-1活性测定结果:与3天正常组比较,3天模型组结果有显著统计学差异(P<0.01),3天针刺组结果有统计学差异(P<0.05);与3天模型组比较,5天正常组、5天模型组、5天针刺组、10天正常组、10天模型组、10天针刺组结果有显著统计学差异(P<0.01),3天针刺组结果有统计学差异(P<0.05);与3天针刺组比较,5天正常组、5天针刺组、10天正常组、10天模型组结果有统计学差异(P<0.05);余结果无统计学意义。3.HO-2活性的测定结果:与正常组比较,3天模型组、3天针刺组、5天模型组、5天针刺组、10天模型组、10天针刺组结果有统计学意义(P<0.05);与3天模型组比较,3天针刺组结果有统计学意义(P<0.05),5天模型组、5天针刺组、10天模型组、10天针刺组结果有统计学意义(P<0.01);与3天针刺组比较,5天模型组、5天针刺组、10天模型组、10天针刺组有统计学意义(P<0.05);余无统计学意义。4.CO含量的测定结果:与正常组比较,3天模型组、3天针刺组、5天模型组结果有统计学差异(P<0.01);与3天模型组比较,3天针刺组、5天模型组5天针刺组、10天模型组、10天针刺组结果有统计学差异(P<0.01);与3天针刺组比较,5天针刺组、10天模型组、10天针刺组结果有统计学差异(P<0.01);与5天模型组比较,5天针刺组、10天模型组结果有统计学差异(P<0.01)。余结果无统计学差异。5.电镜Cajal细胞结果:(1).正常组:Cajal细胞多成梭形,细胞核清晰,呈卵圆形,细胞内染色质均匀、清晰,细胞核周围胞质较少,胞内细胞器如:线粒体、内质网、高尔基体等发育良好;胞浆内中间丝清楚,数量较多,多分布在细胞核周围;基底膜完整;神经突触连接清楚。(2).模型组:①模型3天组:Cajal细胞凸起明显减少,胞浆少,胞浆内出现数量较多的空泡;细胞器数量明显减少,细胞器存在广泛病变,线粒体肿胀明显,线粒体嵴断裂;内质网扩张明显,粗面内质网脱颗粒;基底膜不完整。②模型5天组:Cajal细胞形状不规则,细胞核固缩,异染色质趋边,细胞内胞浆稍丰富,细胞结构稍清晰;线粒体肿胀,结构不清;中间丝数量稍多,基底膜不完整。③模型10天组:细胞内胞浆丰富,细胞器数量较多,部分结构不清晰;线粒体部分肿胀,可见少量溶酶体;部分粗面内质网脱颗粒,中间丝清晰,基底膜稍完整。(3)针刺组:①针刺3天组:细胞内胞浆丰富,细胞器数量较多,结构较清晰;线粒体部分肿胀;内质网扩张不明显;中间丝清晰,基底膜欠完整。②针刺5天组:Cajal细胞形状规则,多为梭形,细胞内染色质较均匀,细胞核周围胞质丰富,细胞器数量较多,结构清楚,线粒体数量较多,结构清晰;内质网无扩张;可见少量高尔基体、溶酶体;基底膜较完整。③针刺10天组:Cajal细胞多成梭形,细胞核清晰,呈卵圆形,细胞内染色质均匀、清晰,细胞核周围胞质较少,胞内细胞器发育良好;胞浆内中间丝清楚,数量较多,多分布在细胞核周围;基底膜完整;神经突触连接清楚。结论:1.针刺能改善胃肠功能障碍SD大鼠的小肠推进率,针刺组小肠蠕动恢复时间明显比模型组恢复时间缩短。2.针刺能降低术后应激增高的胃肠道HO-1、HO-2活性,使CO合成量减少,CO介导的胃肠道平滑肌舒张功能减弱,促进胃肠道蠕动功能的恢复。3.针刺对手术损伤带来的HO-2活性下降具有调节作用,能促进其回复正常。4.在POI中,高浓度CO与KIT表达下降并存,提示CO在高浓度下反而不利于ICC生存