论文部分内容阅读
目的:1.明确高脂饮食对Fpn1 Tek-cre小鼠铁代谢的影响及其与内皮损伤、氧化应激及铁调素相关性;2.明确活血化痰配伍对高脂血症合并铁代谢异常小鼠的保护效应及其分子机制。方法:1.将16只8周龄雄性fpn1 tek-cre小鼠,适应性饲养一周后,随机分为2组,每组8只,其中8只喂养高脂饲料,做实验组(MOD,model group);8只喂饲普通饲料,为正常对照组(NOR,normal group)。造模8周处死两组小鼠。所有小鼠均取血、分离肝脏及主动脉。全自动生化分析仪检测:TC、TG、LDL-C、HDL-C、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);ELISA法测定血清铁调素(hepcidin)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、白介素-6(IL-6);2.40只8周龄雄性Fpn1 Tek-cre小鼠予以高脂饲料喂养8周后,随机分为模型组(MOD)、阿托伐他汀组(ATO,Atorvastatin group)、丹参组(SM,Salvia miltiorrhiza group)、瓜蒌组(TKM,Trichosanthes Kirilowii Maxim group)、丹参瓜蒌组(SM-TKM),每组8只。继续高脂喂养,按人体重和动物间体表面积折算的等效比值的临床推荐剂量分别给予生理盐水、阿托伐他汀混悬液5.1mg/kg、丹参组2.56g/kg、瓜蒌组3.84g/kg、丹参瓜蒌组6.4g/kg连续灌胃2周后处死,分离血清、肝脏及主动脉。全自动生化分析仪检测:TC、TG、LDL-C、HDL-C、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);ELISA法测定血清铁调素(hepcidin)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、白介素-6(IL-6);免疫组织化学法观察主动脉组织内骨形态发生蛋白(BMP-6,bone morphogenetic protein-6)表达;Western blotting检测主动脉组织p-smad1/5/8、p-stat3蛋白表达量。结果:1.高脂饮食后,与NOR组比较,MOD小鼠血清中TG、TC、LDL及hepcidin水平均明显增高(P<0.01),肝脏铁细胞计数增多(P<0.05),出现明显的铁沉积;同时血清ET-1、IL-6、MDA水平显著升高(P<0.05),NO及SOD水平显著下降(P<0.05);此外,MOD组内皮BMP-6、p-stat3、p-smad1/5/8蛋白表达水平均显著增加(P<0.05)。2.药物干预后,与MOD组比较,各药物组hepcidin显著下降;肝脏内铁细胞计数显著减少(P<0.05),铁沉积得到显著缓解;同时,血清ET-1、IL-6、MDA水平显著降低(P<0.05),NO及SOD水平明显升高(P<0.05);此外,各药物组主动脉内皮BMP-6、p-stat3、p-smad1/5/8蛋白水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。各药物组间比较,丹参瓜蒌组(活血化痰)效果要优于丹参组(活血)及瓜蒌组(化痰)。结论:1.高脂饮食可诱导Fpn1 Tek-cre小鼠出现明显的铁沉积和内皮功能损伤及氧化应激,同时可引发铁调素相关信号通路表达异常;2.丹参和瓜蒌的活血化痰配伍对高血脂合并铁代谢异常小鼠具有显著地保护效应,其保护机制与调节脂质代谢、改善血管内皮细胞功能、减轻炎症反应、抗氧化损伤相关,同时也与调控铁调素及其相关信号通路间密切相关。