论文部分内容阅读
宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)是茄科(Solanaceae)枸杞属的一种落叶灌木植物,是一种名贵的中药材,具有抗老化、保护神经系统、抗疲劳、提高耐力、促进新陈代谢、降低血糖、抗氧化、抗肿瘤和免疫调节等活性。宁夏枸杞的化学成分包括多糖、色素、生物碱、甾醇和黄酮类,也含有脂肪酸类和挥发油类等成分。枸杞籽是枸杞果实中的种子,可将枸杞鲜果榨汁加工后获得,枸杞籽可采用多种方法提取油脂,提取后的剩余残渣为枸杞籽粕。有关枸杞籽及枸杞籽粕的研究较少,已有的研究主要是关于枸杞籽油脂含量和油脂成分的研究,少量研究涉及多糖含量和酶活性测定,对其中的次生代谢化学成分基本上没有研究报道。对枸杞籽粕仅有少量关于用作饲料或肥料的研究。本研究采用宁夏枸杞籽及枸杞籽粕为材料,进行了4个方面的研究:(1)采用苯酚-硫酸法对宁夏枸杞籽和籽粕的多糖进行提取和含量测定,同时测定枸杞籽的总酚和总黄酮的含量;(2)测定枸杞籽多糖对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的清除能力,分析对Fe离子的总还原能力;(3)通过比较不同提取方法、不同提取溶剂和不同萃取溶剂获得的提取液或萃取液的HPLC图谱,建立枸杞籽化合物分离的优化提取条件;(4)联合应用硅胶柱层析、凝胶层析和ODS反相层析等方法,对二氯甲烷萃取物和水相萃取物进行分离,通过TLC和HPLC方法鉴定分离化合物纯度,再经核磁共振波谱法确定其结构。主要研究结果如下:1、枸杞籽多糖含量高于枸杞籽粕,分别为28.4 mg/g和13.2 mg/g;枸杞籽的总酚和总黄酮含量分别为26.7 mg/g和5.8 mg/g。2、枸杞籽多糖对3种自由基的清除效应都具有浓度依赖效应,即随浓度增高清除率也提高。对DPPH自由基的清除效果最好,在相同浓度时均高于对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除率。在0.6 mg/m L浓度时,对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为84.2%、61%和40%。枸杞籽多糖对Fe3+还原能力也与其浓度呈正相关关系。3、用不同溶剂提取枸杞籽及枸杞籽粕,提取效果以95%乙醇为佳,其次为甲醇;以95%乙醇作提取溶剂,采用热回流提取或超声波辅助提取,两种方法的提取效果没有明显差异;对热回流提取获得的乙醇粗提物浸膏,比较不同萃取溶剂(石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇)以及萃余水相的色谱分离效果,发现石油醚萃取物、二氯甲烷萃取物和萃余水相中具有更多的成分。两种材料比较,枸杞籽粕的提取及萃取效果优于枸杞籽。4、从二氯甲烷萃取物和萃余水相浓缩物共分离获得11个单体化合物,鉴定了其中8个化合物的结构,分别是:β-谷甾醇(化合物1),棕榈酸(化合物3),山楂酸(化合物4),东莨菪素(化合物6),豆甾醇(化合物8),胡萝卜苷(化合物9),东莨菪苷(化合物10),阿魏醛(化合物11)。经鉴定,该8个化合物均为已知化合物。综上所述,本研究表明,枸杞籽或枸杞籽粕中含有多糖、总酚及黄酮类等抗氧化活性成分,所分离的化合物包括甾醇、酚酸、糖苷和香豆素类等成分,与枸杞中的化学成分类似。