【摘 要】
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目的本文主要探讨三种消毒方法(紫外辐射、环氧乙烷熏蒸、乙醇浸泡)对聚乳酸(PLA)电纺支架理化性能及生物相容性的影响,从而为组织工程支架消毒方法的选择提供参考依据。方法
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目的本文主要探讨三种消毒方法(紫外辐射、环氧乙烷熏蒸、乙醇浸泡)对聚乳酸(PLA)电纺支架理化性能及生物相容性的影响,从而为组织工程支架消毒方法的选择提供参考依据。方法将一定质量的PLA材料溶于三氟乙酸和二氯甲烷的混合溶剂,搅拌均匀后制得质量分数为8%的纺丝液,静电纺丝得到PLA电纺支架。然后将PLA电纺支架制成直径为13 mm的圆片状样品,用紫外辐射、环氧乙烷熏蒸、乙醇浸泡三种常用方法进行消毒处理后,采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)、X射线衍射(XRD)和热重分析(TGA)检测分析支架化学性能、结晶性能和热性能的变化。利用水接触角(WCA)测试检测支架材料表面的亲水性,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法评估支架材料的细胞毒性,定量分析支架上细胞的增值率。用扫描电镜(SEM)观察支架的微观形貌、纤维的变化以及细胞在支架上黏附及伸展情况。与此同时,用无菌磷酸盐缓冲液(PBS)处理经环氧乙烷消毒后的支架,对比分析其细胞毒性及细胞黏附和伸展情况。结果在消毒后检测PLA电纺支架理化性能的实验中,扫描电镜结果表明对照组PLA支架纤维形态呈圆柱状,纤维之间纵横交错成网状;环氧乙烷组支架纤维融合最为严重,整体呈现出一种海绵状结构,而纤维则呈现条带状,其直径和纤维间孔径都发生了变化;紫外辐射组和乙醇组纤维形态未发生明显变化,接近于对照组。FTIR测试结果显示不同消毒方法处理后的PLA支架的红外光谱特征峰波动趋势相似,各组支架可基本保持其原有的化学特性。XRD测试发现不同消毒方法处理后支架的结晶峰强度有所增强,其中环氧乙烷组最高。TGA结果表明消毒后支架的初始分解温度都有所增加,其中乙醇组最高。由WCA测试结果可知,消毒处理后PLA支架表面的接触角都有所降低,其中乙醇组下降最为显著。在消毒后检测PLA电纺支架生物相容性的实验中,第7天MTT结果表明实验组中乙醇组OD值最高,环氧乙烷-PBS组次之(P>0.05),但两者都高于环氧乙烷组(P<0.001);紫外辐射组的OD值高于环氧乙烷组(P<0.001)。扫描电镜观察消毒后支架上细胞生长状态发现,乙醇组支架上细胞黏附、伸展的状态最好,表现出典型雪旺细胞的形态,其次是环氧乙烷-PBS组和紫外辐射组;环氧乙烷组支架上细胞大多呈球形,未能较好的黏附和伸展。结论紫外辐射、环氧乙烷熏蒸、乙醇浸泡三种常用消毒方法均可用于PLA电纺支架的灭菌,但乙醇浸泡法对PLA电纺支架的理化性能影响较小,可明显改善支架的生物相容性,在医学组织工程支架消毒方面具有较高的应用价值。无菌PBS处理后可明显改善经环氧乙烷消毒支架的生物相容性,这对消毒方法的改进具有一定的指导意义。
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