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目的:探究白杨素脂质体(chrysin liposomes,CL)对肝缺血再灌注损伤(hepatic ischemia-reperfusion injury,HIRI)的作用及其潜在机制。方法:1.白杨素脂质体的制备及评价以胆固醇、卵磷脂为膜材料,用薄膜分散法制备白杨素脂质体。用紫外分光光度仪对白杨素脂质体进行测定并计算其载药量和包封率;用马尔文粒度仪对白杨素脂质体的粒径分布和Zeta电位进行测定;用透射电镜对白杨素脂质体的形态进行观察;用超高效液相色谱-质谱联用仪分别对白杨素脂质体及白杨素给药组小鼠的肝脏和血清中的药物浓度进行检测。2.白杨素脂质体对干缺血再灌注损伤的作用及机制研究将雄性C57BL/6J小鼠随机分成4组:假手术组(Control)、肝缺血再灌注模型组(HIR)、肝缺血再灌注模型组+白杨素脂质体组(HIR+CL)和白杨素脂质体药物对照组(CL),每组6只。其中CL组和HIR+CL组小鼠于术前16.5 h、8.5 h、0.5 h给予白杨素脂质体(100mg/kg)灌胃;同时Control组和HIR组给予等体积的0.9%NS灌胃。用无创动脉夹夹闭肝左和肝中叶的肝动脉及门静脉分支,造成70%肝组织缺血,90 min后移除动脉夹恢复血液再灌注。于再灌注6 h收集血液,并于再灌注24 h处死小鼠收集肝组织进行后续分析。用试剂盒测定天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)水平以评估肝损伤程度;用苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色,观察肝组织形态学改变;用活性氧荧光探针——二氢乙啶(Dihydroethidium,DHE)检测肝组织中活性氧水平;用丙二醛(malonaldehyde,MDA)试剂盒检测组织中脂质过氧化的水平;用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测肝细胞的凋亡;用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)技术检测炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达;用免疫荧光(immunofluorescence,IF)技术检测肝实质中白细胞及中性粒细胞的浸润;用免疫蛋白印迹法(western blot,WB)检测肝组织中Bcl-2、BAX、C-Casp-3、NLRP3、ASC、C-Casp-1、IL-1β蛋白表达水平。结果:1.制备的白杨素脂质体形态呈球形或近球形,粒径大小为129±13.53 nm,PDI为0.265±0.021,zeta电位-34.46±4.14 mV,包封率为95.03±2.17%,载药量为16.4±0.8%。白杨素脂质体相较白杨素单体而言,血液中药物浓度提高了2.54倍,肝脏中的药物浓度提高了1.45倍。2.与Control组相比:HIR组小鼠血清ALT和AST的活性水平显著升高;肝血窦充血明显,肝组织中出现大量的局灶性坏死;凋亡肝细胞数量显著增多;肝组织中炎性细胞浸润显著增多,且IL-6、TNF-α表达明显增多;肝组织中DHE阳性细胞增多,MDA含量显著升高;肝组织中凋亡相关蛋白C-Casp-3、BAX蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低;肝组织中NLRP3炎性小体信号通路中NLRP3、ASC、C-Casp-1、IL-1β蛋白表达增加。与HIR组相比:HIR+CL组小鼠的血清ALT、AST活性水平明显下降;肝血窦充血减轻,肝组织局灶性坏死区域面积减少;凋亡肝细胞细胞数量显著减少;肝组织中炎性细胞浸润数量显著减少,且细胞因子IL-6、TNF-α表达降低;肝组织中DHE阳性细胞显著减少,组织中MDA含量显著降低;肝组织中凋亡相关蛋白C-Casp-3、BAX蛋白表达下降,Bcl-2蛋白表达升高;肝组织中NLRP3炎性小体信号通路中NLRP3、ASC、C-Casp-1、IL-1β蛋白表达下降。结论1、以卵磷脂和胆固醇为膜材料,经薄膜分散法可成功制备白杨素脂质体。制备的白杨素脂质体能显著提高白杨素相对生物利用度且能提高肝脏(靶器官)中的药物浓度。2、白杨素脂质体通过抗炎、抗氧化、抗凋亡途径能有效缓解肝缺血再灌注损伤。3、这种保护作用可能与白杨素脂质体抑制NLRP3炎性小体活化,下调NLRP3、ASC、C-Casp-1、IL-1β蛋白表达有关。