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肾透明细胞癌（clear cell Renal Cell Carcinoma,ccRCC）是恶性上皮细胞癌。癌细胞内脂质的积聚是其特征细胞表型之一。寻找ccRCC中脂质堆积的相关因素,对于预防ccRCC,以及采取针对性的措施延缓ccRCC的发展,从而提高ccRCC患者的生存质量和生活水平有着重要临床和社会意义。已有的研究显示,过氧化物酶体脂肪酸β-氧化的减少或缺失也会导致细胞脂肪变性。烯脂辅酶A水合酶/3-羟酰辅酶A脱氢酶（D-bifunctional protein,DBP）是过氧化物酶体脂肪酸β-氧化途径中的酶蛋白。生物信息学分析显示,DBP在ccRCC癌细胞中的mRNA表达水平比正常组织低。因此,ccRCC患者癌细胞中的DBP表达确实下调了吗?如果下调,ccRCC患者癌细胞中的脂质聚集与DBP的下调有关?值得研究。目的:探究DBP与ccRCC中脂质沉积的关系方法:用免疫组化,原位杂交以及油红O染色的方法,分别检测肾透明细胞癌（clear cell Renal Cell Carcinoma,ccRCC）癌组织和配对的癌旁组织中DBP在蛋白质和mRNA水平的表达量,以及脂质沉积;过表达DBP和敲降DBP后,用Western blot,定量RT-PCR以及油红O染色方法,观察DBP的表达变化对肾透明细胞癌细胞株786-O细胞内脂质量影响。1. 采集标本及处理:从河北医科大学第二医院采集ccRCC患者手术切除的新鲜癌（Ca）组织和癌旁（Adj）组织。石蜡包埋切片,用于免疫组化,原位杂交,经全片扫描后,计算H-Score值,对DBP的表达量进行相对定量;OCT包埋,进行油红染色,用于观察组织中脂质沉积情况。2.细胞的处理培养肾小管来源的,抑癌基因VHL（-/-）缺失的肾透明细胞癌786-O细胞株。过表达和敲低对数生长期的786-O细胞的DBP（48 h）后,收集细胞进行Western blot及定量RT-PCR分析,检测DBP是否成功过表达或敲低;并在细胞长满后6天,进行油红O染色检测细胞的脂质水平。结果:1. ccRCC患者癌组织与癌旁组织的病理特点:HE染色结果显示,癌组织中（Ca）,正常的肾组织结构消失而呈巢状结构,细胞膜清晰但胞浆呈透明状、淡染;而癌旁组织中（Adj）,可见正常肾小管结构,肾小管的管腔完整,胞浆饱满,呈伊红色。2. ccRCC患者癌组织中存在大量的脂质沉积肾组织油红O染色结果显示,癌组织（Ca）较癌旁组织（Adj）的红色颗粒明显多且红色深3. ccRCC患者癌组织的DBP蛋白表达下调免疫组化结果显示:DBP蛋白主要在正常的肾小管上皮细胞中表达,在ccRCC癌组织中,DBP的表达下调。相对定量的H-Score值显示,ccRCC患者癌组织中DBP的蛋白含量明显降低（P=0.022<0.05）。4. ccRCC患者癌组织的DBP mRNA表达降低原位杂交结果以及相对定量的H-Score显示:DBP mRNA在ccRCC癌组织中表达下调（P=0.005<0.05）。5. 改变DBP的表达可影响肾透明细胞癌786-O细胞的脂质含量5.1 过表达DBP蛋白可减少786-O细胞的脂质含量Pc DNA3.1-DBP质粒转染786-O细胞后,过表达DBP的786-O细胞,其油红染色的红色颗粒数量少且颜色浅。5.2 降低DBP表达可增加786-O细胞内的脂质含量DBP SiRNA转入786-O细胞内后,DBP表达降低,油红染色的红色颗粒数量增加。结论:1.ccRCC癌组织中伴随脂质的沉积DBP的表达下降2.DBP的表达下降或者增加会导致786-O细胞中的脂质的增加或下降综上,ccRCC患者癌组织的脂质沉积很可能与其DBP的表达下降有关