白藜芦醇调控脂质代谢影响肉鸭肉品质的机制研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:orangeboy2222
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樱桃谷鸭是著名的优质肉鸭品种,具有生长快、饲料报酬高、养殖成本低等特点,但相对于国内其他地方品种,其体内脂肪沉积快且多为皮下和腹部脂肪,市场上因其“油”和“腻”而影响消费,如能通过营养调控策略降低脂肪含量,改善肉鸭肉品质,则可为市场提供健康与美味兼得的鸭肉产品。近年来研究发现,白藜芦醇具有降脂的功效,对动物产品品质具有改善作用。因此,本研究将以樱桃谷鸭为对象,系统研究白藜芦醇对肉品质的改善效果,寻找影响脂质代谢的关键基因,诠释白藜芦醇降低肉鸭脂肪沉积可能存在的代谢通路和机制,为白藜芦醇在水禽养殖中的推广应用提供试验依据,为肉品质的营养调控奠定理论基础。论文研究分为表型研究和机制研究两个部分。选取432只1日龄健康樱桃谷鸭(公),按单因素完全随机设计,分成4个日粮处理,分别在基础日粮中添加0 mg/kg、150 mg/kg、300 mg/kg、450 mg/kg的白藜芦醇(纯度≥98%),每个处理设6个重复,每个重复18只肉鸭,试验期共42天,分为饲养前期(0-21d)和后期(22-42d)两个阶段。表型研究中,分别测定肉鸭生长性能、屠宰性能、肉品质(常规指标、肉质性状、主要氨基酸和脂肪酸等成分组成)、肌肉特性和养分利用。机制研究包括肌肉发育和脂质代谢相关基因表达和脂质组学,主要研究结果如下:1白藜芦醇对肉鸭生长性能、屠宰性能和养分利用的影响动物饲养试验旨在通过研究不同剂量白藜芦醇对肉鸭生长性能、屠宰性能和养分利用的影响,得出肉鸭饲粮中白藜芦醇的适宜添加剂量。结果表明:白藜芦醇的添加显著提高了第一阶段(0-21天)肉鸭的日增重(P<0.05);添加300 mg/kg的白藜芦醇显著提高了第二阶段(21-42天)肉鸭的日增重;从试验全期看,试验鸭日增重与白藜芦醇剂量呈二次关系(P<0.05)。450 mg/kg白藜芦醇组采食量有下降的趋势(P>0.05);随着白藜芦醇剂量的增加,试验鸭21日龄肝脏重量与42日龄腹脂率线性降低(P<0.05);钙、粗灰分、丝氨酸、亮氨酸的全肠道表观代谢率线性提高(P<0.05),能量、丝氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸回肠消化率线性提高(P<0.05)。添加适宜剂量的白藜芦醇能够有效提高肉鸭生长性能,促进营养素和矿物质的消化吸收,综合考虑日增重、采食量和经济效益等因素,白藜芦醇在肉鸭饲粮中的添加量以300 mg/kg为宜。2白藜芦醇对肉鸭肉品质和肌纤维特性的影响本试验通过屠宰性能测定和纤维特性分析,研究白藜芦醇对肉鸭肉品质和肌纤维特性的影响,旨在为阐明营养调控机制奠定组织学基础。结果表明:饲粮中添加白藜芦醇可以显著降低肉鸭肌肉剪切力,改善肌肉中氨基酸和脂肪酸组成,改变肌纤维性状,提高肉品质。与不添加白藜芦醇组相比,450 mg/kg白藜芦醇组腿肌滴水损失降低16.32%(P<0.05);300 mg/kg白藜芦醇组腿肌剪切力降低13.17%(P<0.05)。随着白藜芦醇剂量的增加,胸肌剪切力线性降低(P<0.05),肉色a*24 h、b*24h和胸肌粗蛋白含量线性增加(P<0.05),腿肌肉色L*45min线性降低(P<0.05),a*45min线性增加(P<0.05);胸肌中组氨酸、精氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、非必需氨基酸线性增加(P<0.05),已酸、棕榈酸含量呈线性上升(P<0.05),十五烷酸、二十碳烯酸线性降低(P<0.05)。腿肌络氨酸、苯丙氨酸线性增加(P<0.05);与对照组相比,300 mg/kg和450 mg/kg白藜芦醇组的胸肌风味氨基酸含量显著提高(P<0.05),戊酸、肉豆蔻酸、十五烷酸、花生酸含量线性降低(P<0.05)。HE染色切片结果显示:与对照组相比,300 mg/kg和450 mg/kg白藜芦醇组的胸肌纤维直径和横截面积显著下降(P<0.05),450 mg/kg白藜芦醇组的肌纤维密度最大(P<0.05)。实时荧光定量PCR测定结果表明,添加450 mg/kg的白藜芦醇显著上调了肉鸭胸肌和腿肌Myo D的基因表达(P<0.05),下调了腿肌内MSTN基因的表达。添加不同剂量的白藜芦醇均能显著上调腿肌内PPARα基因的表达(P<0.05)。说明白藜芦醇通过调控肌肉发育相关基因的表达,使肌纤维更细、更密,进而导致肌肉剪切力下降,嫩度上升,从而改善了鸭肉品质。3白藜芦醇对肉鸭脂质代谢的影响白藜芦醇可改善肉鸭血脂谱,调控脂质代谢相关激素、酶活和基因表达。与对照组相比,添加300 mg/kg和450 mg/kg的白藜芦醇显著提高了42日龄肉鸭甘油三酯、胰蛋白脂酶、总脂酶、脂联素、T3的水平(P<0.05),21日龄血清胰高血糖素水平、42日龄瘦素、LDL-C及其与HDL-C的比值随着白藜芦醇的添加量的上升线性下降(P<0.05),21日龄T4与FT4呈二次变化(P<0.05)。与对照组相比,添加300 mg/kg的白藜芦醇可显著下调肉鸭血清中ACC和肝脏中SREBP-1的mRNA表达(P<0.05),添加450 mg/kg的白藜芦醇可显著下调血清和肝脏中FAS基因mRNA表达(P<0.05),上调血清脂联素mRNA表达(P<0.05),添加300 mg/kg和450 mg/kg的白藜芦醇可显著下调血清中LPL和肝脏中PPARγ基因mRNA表达(P<0.05),同时上调血清和肝脏SIRT1基因mRNA表达(P<0.05),白藜芦醇的添加能显著上调肝脏FOXO1基因mRNA表达(P<0.05)。表明白藜芦醇通过调控脂质代谢相关基因表达,有效减少脂肪沉积,通过提高血清中甘油三酯含量和降低LDL-C含量,优化血脂谱组成,并促进脂质代谢相关酶活和激素分泌。4基于脂质组学研究白藜芦醇对肉鸭脂质代谢调控的机制选取对照组和450 mg/kg白藜芦醇组的试验鸭肝脏组织进行脂质组学检测,提取肝脏总脂质代谢物,利用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法,计算出样本中脂质物质的绝对含量,根据PLS-DA模型和t检验筛选出50个差异性代谢物(P<0.05,VIP>1),发现白藜芦醇可以显著下调1种DG、1种PA、10种PC、1种PE、2种SM、5种Sphingosine的含量,显著上调2种Cer、2种PG、5种PE、21种TG含量。甘油磷脂代谢通路和鞘磷脂代谢通路是白藜芦醇影响肉鸭脂类代谢最重要的两条通路。综上,白藜芦醇可以提高肉鸭的生产性能,促进营养素和矿物质的消化吸收,通过改变肌纤维特性和氨基酸、脂肪酸组成比例,改善了嫩度和口感等肉品质指标。通过上调了肝脏中脂联素的基因表达,促进肉鸭机体新陈代谢,调节机体胰岛素水平,同时降低了血清中LPL基因表达,减少脂肪酸摄取;通过激活SIRT1,提高FOXO1基因表达水平,并通过下调SREBP-1c和ACC基因表达,进而抑制FAS的转录调控,抑制脂肪酸从头合成,有效减少了脂肪沉积,并改善了血脂谱中甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇组成,影响与脂质代谢相关的胰蛋白脂酶、总脂酶等活性及胰高血糖素、瘦素、脂联素、T3、T4与FT4的水平。白藜芦醇极有可能是通过鞘磷脂代谢通路调节脂肪细胞凋亡,并通过模拟能量限制改变了甘油磷脂代谢网络,导致肉鸭脂联素分泌增加、瘦素水平下降,影响脂质组成,进而调控肉鸭脂肪沉积。
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