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目的观察不同浓度盐霉素在体外对人肝癌细胞HepG2增殖及细胞周期的影响，为进一步研究盐霉素抗肿瘤细胞机制提供理论数据。方法①MTT法观察盐霉素对肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用。实验共分为5、10、20、50、100、200μmol/L六个盐霉素浓度组及DMSO溶媒对照组、空白对照组，通过酶标仪测出药物作用24h、48h、72h的OD值，用ORIGIN8.0软件绘制出抑制率与盐霉素浓度和作用时间关系图；②观察盐霉素对HepG2细胞集落形成的影响。筛选出3个有效浓度组5、10、20μmol/L，以每孔1000个细胞浓度接种至6孔板上，分别加入不同浓度盐霉素和DMSO，14天后终止培养，用甲醇固定15分钟、Giemsa染色10分钟后统计各孔肉眼可见集落形成数，计算出集落形成率；③观察盐霉素对HepG2细胞形态的影响。将相同浓度的细胞接种于6孔板上，12h后分别向各孔加入不同浓度盐霉素和DMSO，24h后DAPI染色，荧光显微镜下观察HepG2细胞的形态学变化；④观察盐霉素作用细胞后各分裂周期细胞比例的变化。将相同浓度的细胞接种于6孔板上，待细胞浓度达到106后，分别向各孔加入不同浓度盐霉素和DMSO，24h后收集细胞，离心固定，PI染色，流式细胞仪测出各组细胞的细胞周期；⑤Western Blot检测20μmol/L浓度组盐霉素对Bax、P53基因表达的影响。结果①盐霉素对HepG2细胞的体外增殖抑制作用明显，盐霉素作用HepG2细胞24h后空白对照组、DMSO组以及盐霉素浓度5、10、20、50、100、200μmol/L组的细胞存活率分别为100.00％、99.69％、91.79％、66.34％、64.07％、33.76％、25.40％、7.18％，盐霉素作用HepG2细胞48h后空白对照组、DMSO组以及盐霉素浓度5、10、20、50、100、200μmol/L组的细胞存活率分别为100.00％、93.43％、74.60％、63.45％、48.32％、4.70％、2.16％、1.83％，盐霉素作用HepG2细胞72h后空白对照组、DMSO组以及盐霉素浓度5、10、20、50、100、200μmol/L组的细胞存活率分别为100.00％、98.02％、54.35％、35.15％、14.74％、0.96％、0.93％、0.77％；②集落实验空白对照组、DMSO组以及盐霉素浓度5、10、20μmol/L组集落形成率分别为31.03％、30.71％、24.93％、21.90％、10.27％；③盐霉素处理组细胞荧光显微镜下观察到凋亡细胞的形态学改变，以10μmol/L组和20μmol/L组最为明显，表现为胞膜破裂，细胞核固缩,呈强蓝色荧光致密团块，染色质浓缩边聚向核膜靠拢形成半月形，部分细胞发生核碎裂，凋亡小体形成等细胞形态学改变；④流式细胞仪检测细胞周期空白对照组、DMSO组以及盐霉素浓度5、10、20μmol/L组G1期细胞比例分别为71.40％、71.87％、70.80％、70.83％、79.20％，G2期细胞比例分别为10.83％、10.73％、10.50％、11.53％、7.36％，S期细胞比例分别为17.80％、17.40％、18.70％、17.63％、13.53％；⑤WB实验20μmol/L浓度组P53、Bax蛋白较对照组明显增强。结论①盐霉素对肝癌细胞HepG2的体外增殖有较强的抑制效应，且具有良好的浓度依赖性和时间依赖性；②盐霉素可能是通过增强P53基因的表达将细胞周期阻滞在G1期从而抑制癌细胞增殖；③盐霉素可能是通过增强P53、Bax基因的表达来促进细胞凋亡，从而对肿瘤细胞产生抑制作用。