目的本文将电化学生物传感器方法的高特异性和纳米金双标记的信号放大作用结合在一起，构建一种超灵敏检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌上mecA基因片段的电化学生物传感器,有望用于临床实际标本的早期快速检测。方法制备核酸和酶双标记纳米复合物，并分步探讨核酸、核酸和酶双标记的纳米金复合物等不同修饰步骤的电极的电化学行为。研究超灵敏检测金黄色葡萄球菌上mecA片段的电化学生物传感器方法，并对其检测条件进行优化，然后对该生物传感器进行方法学评价。首先在恒电势下，将裸玻碳电极浸入在氯金酸溶液中，电沉积纳米金颗粒。然后固定捕获探针，MCH封闭电极表面的非特异结合位点，加入目标探针与捕获探针形成“A=T”，“C=G”互补配对，最后加入双标记的检测探针,形成“三明治”夹心结构，在酶的催化作用下，产生电流信号。与其他同类方法相比，该方法明显减弱分别加入检测探针和酶繁琐的程度，大大缩减了反应时间，避免了实验中的相对误差，提高了整个实验的灵敏度。利用优化实验中探索出的最佳反应时间和酶的浓度，用差分脉冲伏安法对待测物所引起的电流信号变化进行检测，电极的不同修饰步骤用扫描电子显微镜（SEM）进行表征，电极的阻抗变化用电阻抗谱（EIS）进行表征。结果基于以上检测探针与酶同时标记纳米金的双标记结构，目标探针分别与捕获探针，检测探针形成“三明治”夹心结构，所构成的DNA生物传感器，在最优化实验条件下，检测信号与目标DNA的浓度在50-250pM内形成良好的线性关系，最低检测限达23pM。结论本文已成功应用检测探针与碱性磷酸酶同时标记纳米金的检测技术，与DNA电化学生物传感器相结合；实现了对金黄色葡萄球菌mecA基因片段的灵敏检测，检测时间控制在2小时以内。再对检测的最佳条件摸索后显示较宽的检测线和良好的重现性，对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测提供了较好的平台，该传感器具有很高的灵敏度和良好的特异性，为临床医生对疾病的及时诊断提供了重要线索。