新疆绵羊种质资源调查、保护及遗传多样性

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本实验对新疆8个地方品种绵羊进行了资源调查,采集了各品种羊的耳组织和血液样本,提取其血液DNA,构建了新疆地方品种绵羊基因库或资源库;运用AFLP分子标记技术,对策勒黑羊、多浪和柯尔克孜羊进行了遗传多态性分析。研究结果如下:1.分别对策勒黑羊、多浪、柯尔克孜羊、塔什库尔干羊、和田羊、哈萨克羊、阿勒泰羊和巴什拜羊的种质资源与保种状况进行调查。策勒黑羊的保种工作主要是在策勒县策勒乡建立保种区,实行自群繁育,同时加强本地区品种选育工作,巩固和提高多胎性能。多浪羊保种工作主要是在喀什地区麦盖提县的多浪羊种羊场进行,通过采用活畜原地保存和冷冻精液保存相结合的方法开展保种工作,同时加强本品种选育工作。柯尔克孜羊、塔什库尔干羊、和田羊有核心群,但尽早建立原种场就可以很好的保护这一品种。哈萨克羊、阿勒泰羊由于盲目杂交现象严重,要进一步加大保种措施。巴什拜羊已在裕民县建立了保种场和基因库,因此得到了很好的保护。2.分别随机采集了策勒黑羊、多浪羊、柯尔克孜羊、塔什库尔干羊、和田羊、哈萨克羊、阿勒泰羊、巴什拜羊的耳组织样、血样及部分冷冻精液样品。采用萨姆布鲁克等的方法,制备了各品种绵羊基因组DNA,其DNA片段平均大小在50kb以上。建成了国内较完整的地方绵羊品种资源库,包括新疆8个地方绵羊品种的基因库(收集DNA样本30~100份)、离体材料库(收集耳组织样本30~100份)和绵羊生殖细胞库(收集多浪羊的冻精颗粒)。分别保存于-80℃冰箱和-196℃的液氮中。3.本研究共对64对MseI和EcoRI引物组合进行多次重复筛选,其中均扩增出条带多且多态性百分率高、带型丰富、条带清晰的引物组合11对(E01/M02、E01/M07、E02/M02、E04/M01、E05/M05、E05/M08、E06/M02、E06/M04、E06/M05、E07/M03、E07/M08)。在3个地方绵羊品种中共检测到543条带,平均每个引物组合产生49.37条,变化范围在39-64条,其中多态性条带总数为54条,占扩增总带数的9.94%,每对引物平均扩增多态性带4.90条。4.用筛选出的11对E+3/M+3引物,对策勒黑羊、多浪和柯尔克孜羊基因组DNA进行AFLP扩增。根据AFLP分析结果,统计了每个引物组合在各品种中检测到的多态性条带和特异性条带,计算了3个绵羊品种的遗传相似系数和遗传距离,并构建了UPGMA聚类关系图。5.通过UPGMA聚类分析,将3个地方绵羊品种种群划分为2类。3个地方绵羊品种均得到一定的遗传多样性,其遗传相似系数和聚类结果与各绵羊品种的地理分布、现实状况相吻合。
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