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第一部分不同浓度乳化异氟醚对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的影响目的探讨不同浓度乳化异氟醚(Emulsified isoflurane ,EI)对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的影响,寻找其发挥心肌保护效应的最适浓度。方法健康清洁级雄性成年SD(Sprague-Dawley)大鼠64只,体重180~250g,随机分为8组(n=8),对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、不同浓度乳化异氟醚组(E1组~E6组)。建立大鼠Langendorff离体心脏灌注模型,K-H液平衡灌注20min后,C组K-H液持续灌注115min,IR组K-H液灌注10min后缺血45min,再用K-H液灌注60min,不同浓度乳化异氟醚组用含0.28、0.56、1.12、1.68、2.24和2.80mmol/L乳化异氟醚的K-H液灌注10min后缺血45min,分别再用含相应浓度乳化异氟醚的K-H液灌注60min。记录平衡灌注20min(T0)、缺血前即刻(T1)、再灌注20min(T2)、40min(T3)、60min(T4)时的心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、左心室舒张末压(LVEDP)和左心室压力最大上升速率(﹢dp/dtmax);于T0,2~4时测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和肌钙蛋白(CTnI)的浓度。再灌注60min时取下心脏,计算心肌梗死面积。结果各组血液动力学指标基础值差异无统计学意义(P>0.05)。与C组比较,IR组HR、LVDP、﹢dp/dtmax、SOD活性降低,LVEDP、LDH活性和CTnI浓度升高,心肌梗死面积增加(P<0.05);不同浓度乳化异氟醚组HR和LVDP降低,LVEDP和LDH活性升高,心肌梗死面积增加(P<0.05);E1和E4组﹢dp/dtmax升高,E1~E5组SOD活性升高,除E4组外,其余浓度乳化异氟醚组CTnI浓度升高(P<0.05)。与IR组比较,不同浓度乳化异氟醚组HR、LVDP、﹢dp/dtmax和SOD活性升高,LVEDP、LDH活性和CTnI浓度降低,心肌梗死面积减少,E4组梗死面积最小(P<0.05)。与E4组比较,其余浓度乳化异氟醚组LDH活性和CTnI浓度升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05)。结论乳化异氟醚可减轻大鼠离体心肌缺血再灌注损伤,从而发挥心肌保护作用,其适宜浓度为1.68mmol/L。第二部分PI3K-Akt-GSK3β信号通路参与乳化异氟醚对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用目的探讨乳化异氟醚(emulsified isoflurane,EI)对离体大鼠心脏缺血再灌注损伤的保护效应与PI3K-Akt-GSK3β信号通路的关系。方法32只雄性SD大鼠随机分为4组(n=8),对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、1.68mmol/L EI组(EI组)、1.68mmol/L EI+100nmol/L Wortmannin组(EW组)。建立大鼠Langendorff离体心脏灌流模型,测定平衡末、再灌注20min、40min、60min时冠脉流出液(CF)中的乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性、肌钙蛋白(CTnI)浓度和再灌注60min时的心肌梗死面积、心肌细胞Caspase-3和Caspase-9的活性与Akt和糖原合成酶激酶-3(GSK3β)的磷酸化水平。结果平衡时和缺血前各项指标值的差异无统计学意(P>0.05)。再灌注各时点,与C组比较,其余各组的LDH和CK活性、CTnI浓度、Caspase-3、Caspase-9活性、Akt和GSK3β磷酸化水平升高,心肌梗死面积增加(P<0.05);与IR组比较,EI组和EW组的LDH和CK活性、CTnI浓度降低,EI组的Caspase-3和Caspase-9活性降低,Akt与GSK3β的磷酸化水平升高,EW组的Caspase-3和Caspase-9活性升高,Akt与GSK3β的磷酸化水平降低,EI组和EW组的心肌梗死面积减少(P<0.05);与EI组比较,EW组的LDH和CK活性、CTnI浓度升高,Akt和GSK3β磷酸化水平降低,Caspase-3、Caspase-9活性升高,心肌梗死面积增加(P<0.05)。结论乳化异氟醚可以减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤,PI3K-Akt-GSK3β信号通路参与乳化异氟醚对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用。