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目的：以连翘二氯甲烷萃取物为研究对象,分离、鉴定其有效成分,并评价它们对酪氨酸酶活性的抑制作用。方法：利用高效液相偶联酪氨酸酶活性检测法指导建立分离有效成分的色谱条件；采用硅胶柱色谱、半制备高效液相色谱、凝胶色谱快速分离纯化有效成分；通过UV、MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱技术鉴定有效成分的结构；应用蘑菇酪氨酸酶活性抑制实验、MTT实验法及B16黑色素瘤细胞内酪氨酸酶活性抑制实验评价了该6种化合物的酪氨酸酶活性抑制能力；利用HPLC法测定连翘中抑制酪氨酸酶有效成分的含量。结果：从连翘二氯甲烷部位中分离得到了6个具有抑制酪氨酸酶活性的成分：分别为三萜类(白桦脂酸、熊果酸)、木脂素类(连翘脂素、连翘苷)、苯乙醇苷类(Forsythoside A、suspensaside A);蘑菇酪氨酸酶活性抑制实验结果显示白桦脂酸、suspensaside A具有明显的抑制作用,白桦脂酸的IC50为100.30μmol/L,与阳性对照熊果苷的IC50值(99.05μmol/L)相当,suspensaside A的IC50值(41.17μmol/L)为阳性对照熊果苷的IC50值的1/2；MTT实验法显示熊果酸、连翘脂素抑制B16细胞生长作用明显,其中熊果酸的IC50值(0.75μmol/L)远远低于阳性对照熊果苷的IC50值(35.53μmol/L),连翘脂素的IC50值(44.641μmol/L)与熊果苷的相当；B16细胞内酪氨酸酶活性抑制实验显示白桦脂酸(IC506.18μmol/L)、熊果酸(IC500.05μmol/L)、连翘脂素、Forsythoside A (IC500.55μmol/L)、suspensasideA(IC505.77μmol/L)均表现出明显的抑制酪氨酸酶的活性,熊果酸的IC50低于阳性对照熊果苷(IC500.07μmol/L)；连翘中Forsythoside A、suspensaside A、连翘苷、连翘脂素、白桦脂酸、熊果酸含量分别为1.57%、0.29%、0.19%、0.06%、0.30%、1.21%。结论：高效液相偶联生物活性检测法能有效的指导筛选活性成分,连翘具有很好酪氨酸酶抑制剂的开发价值。