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可可茶是我国特有的珍稀野生茶树资源,具有天然不含咖啡碱的特性,研究在引种驯化选育中其特征成分的表现是十分必要的,同时对筛选出来的可可茶品种的某些生物活性作用进行研究也有重要意义。本研究以无性系品种可可茶1号和可可茶2号为研究对象,研究了它们的生物学特性和化学特征,及其抗氧化和抗前列腺癌的生物活性。具体研究结果如下:
单株选育及品比试验结果表明:(1)可可茶1号和2号均属小乔木,大叶类,中生型茶树。(2)鲜叶产量较高,比对照品种乐昌白毛2号的产量高出20%以上。(3)适制红茶,香气鲜爽呈嫩香,滋味纯厚,叶底红亮,品质优良。
ISSR指纹图谱结果说明:(1)可可茶1号和可可茶2号具有独特的DNA指纹特征。(2)5个引物共扩增出了52条带,多态性为57.69%。条带大小大约200-1500 bp,不同引物的扩增产物呈现的多态性水平有较大差异。(3)引物836、841、ISSR10和ISSR11均能将可可茶的两个无性系品种区分开来。
主要生化成分分析结果表明:(1)可可茶1号和2号均为纯系品种,优势嘌呤生物碱是可可碱,含量分别为3.92±0.057~6.27±0.055%和4.28±0.051~6.46±0.018%;优势儿茶素组分为(-)-gallocatechin gallate(GCG),含量分别为3.42±0.163~7.35±0.085%和4.98±0.481~7.64±0.083%。(2)可可茶1号和2号的茶多酚总量及氨基酸总量均大于对照品种乐昌白毛2号,但是茶氨酸的含量明显低于对照种。(3)可可茶品种嫩梢的内含化学成份呈季节性变化。氨基酸总量和茶氨酸含量在春季出现峰值,茶多酚、黄酮苷、生物碱及主要儿茶素的含量在夏季出现峰值。
采用异种间嫁接后的可可茶接穗和砧木生化成分分析结果表明:(1)嫁接后的可可茶依然保持着母本的主要化学性状,嫁接不会改变可可茶中儿茶素和生物碱的组分组成,即可可茶1号和2号接穗的优势儿茶素仍为GCG,优势生物碱仍为可可碱,并未检测到咖啡碱。(2)氨基酸特别是茶氨酸含量受砧木的影响较大,嫁接后的可可茶接穗茶氨酸含量较母树有所提高。(3)嫁接后的可可茶树品种的内含化学成份亦呈季节性变化,氨基酸、茶氨酸和生物碱在春季出现峰值,其它各组分均在夏季出现峰值。
体外抗氧化研究结果表明:(1)可可茶的茶多酚含量高于市售绿茶碧螺春和龙井,茶多酚含量大小依次为可可茶2号>可可茶1号>碧螺春茶>龙井茶。(2)龙井和碧螺春茶中优势儿茶素EGCG含量分别为6.07±0.075%和8.27±0.086%,可可茶1号和2号中优势儿茶素GCG含量分别为7.09±0.034%和7.73±0.111%,二者在茶多酚中所占的比例相当。(3)ABTS法、DPPH法和FTC法检测结果显示可可茶具有较高的清除自由基和抑制脂质过氧化的能力,各品种的抗氧化能力大小依次是:可可茶2号>可可茶1号>碧螺春茶>龙井茶。
体外抗癌实验结果表明:(1)可可茶在体外能抑制人雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3的生长,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期于G2/M期。(2)其作用与抑制细胞周期蛋白cyclins,cdks的表达,上调p21,p27蛋白表达,下调Bcl-2和Procaspase-3,-8蛋白表达和抑制NF-κB的活化相关。
体内抗癌实验结果表明:(1)可可茶具有较好的抗人雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3裸鼠皮下肿瘤生长作用,可可茶小剂量组(0.1%)及大剂量组(0.2%)肿瘤质量及体积显著低于对照组(P<0.01),抑瘤率分别为37.14%、60.95%。(2)其作用机制与其下调Bcl-2蛋白表达,抑制NF-κB的活化相关。