北京局部地区散发中枢神经系统病毒感染患者脑脊液中肠道病毒的检测

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背景:肠道病毒感染是世界范围的引起无菌性脑膜炎和病毒性脑炎的常见病因。明确神经系统疾病是否由肠道病毒感染引起的最好方法是检测患者脑脊液中的肠道病毒。细胞培养和中和滴定法一直被认为是肠道病毒检测和分型的金标准,然而,分子扩增技术的快速发展已经使之逐渐在临床和实验室检查中取代传统的方法。传统的病毒培养方法需要大量的时间,目前认为荧光定量RT-PCR是病毒培养的优秀的替代方法。 目的:通过对2008年北京地区部分散发无菌性脑膜炎和病毒性脑炎病人的脑脊液中的肠道病毒检测以期调查这一地区中枢神经系统肠道病毒感染的基本情况。 方法:本研究于2008年从北京三家医院总共收集了36例散发无菌性脑膜炎和病毒性脑炎患者的脑脊液(北京友谊医院23例,北京宣武医院12例,北京天坛医院1例)。所有标本在提取病毒RNA前均于—80℃冰箱冻藏,并于3个月内利用RNA提取试剂盒操作说明提取总病毒RNA,随即将RNA反转录为cDNA并冻藏于—80℃冰箱。最后,用一种快速、敏感的荧光定量PCR技术检测标本中的各种肠道病毒。 结果:在所有的36个患者(27男,9女)中,16人(12男,4女)被诊断为病毒性脑炎,14人(12男,2女)被诊断为无菌性脑膜炎,另外6人(3男3女)被诊断为无菌性脑膜脑炎。这些患者的脑脊液标本中有9人(7男,2女)经检测为肠道病毒阳性,占所有患者总数的25%。这9人中,2例为病毒性脑炎,6例为无菌性脑膜炎,1例为无菌性脑膜脑炎。也就是说,50%的无菌性脑膜炎患者肠道病毒检测结果阳性,而病毒性脑炎和无菌性脑膜脑炎的患者,肠道病毒的检出率分别为12.50%和11.11%。这9例患者的年龄从14岁到54岁不等,平均28岁,有8例发病时间在7—9月,4例颅内压高于180mmH2O,5例脑脊液常规检查白细胞升高,4例脑脊液蛋白含量增高,仅有1例头颅MRI可见脑膜改变,其余8例头颅CT或MRI检查未见异常。 总结: 1、肠道病毒感染是北京地区散发中枢神经系统感染,即病毒性脑炎、无菌性脑膜炎和脑膜脑炎患者的常见病原体,特别是无菌性脑膜炎更多见。 2、北京地区肠道病毒感染最多见于夏季和秋季,。 3、北京地区散发肠道病毒中枢神经系统感染的病例中有明显的男性多发倾向。 4、除了脑脊液常规检查和影像学检查结果之外,通过快速、敏感的荧光定量PCR对脑脊液中的肠道病毒进行检测的方法有助于明确诊断,以期缩短患者的住院时间和减少医疗花费。
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