目的：众多研究发现，缺氧不仅参与肿瘤的血管形成，而且通过各种复杂的机制参与肿瘤细胞的各种生理活动，是肿瘤细胞生长、凋亡、转移和放、化疗耐受的主要驱动力。而在这一系列效应中起着最关键作用的是缺氧诱导因子(Hypoxia-inducible：factor-1，HIF-1)。HIF-1由a和B两个亚单位构成，其中HIF-1a是在特异性缺氧状态下发挥活性的转录因子，并决定了HIF-1的活性。研究表明：许多人类恶性肿瘤包括乳腺癌组织中都发现HIF-1a的过度表达。本课题旨在检测HIF-1a蛋白在乳腺癌组织中的表达水平，及其与临床各项生物学指标的关系，为乳腺癌的诊断、治疗及预后判断提供依据，探讨其作为乳腺癌治疗新靶点的可行性。 方法：选择2000年1月至2001年12月在河北医科大学第四医院外一科手术切除的原发性乳腺癌患者的癌组织标本，共56例，均为女性，年龄27～83岁，中位年龄46岁，所有病例均未发现急性感染及免疫性疾病，且均经病理证实，术前均未接受放疗和化疗。其中浸润性导管癌33例，浸润性小叶癌18例，髓样癌3例，粘液腺癌2例。用免疫组化法检测癌组织中HIF-1a蛋白的表达情况。同时选择乳腺良性肿瘤患者15例(经病理证实乳腺纤维腺瘤5例、腺病瘤5例、导管内乳头状瘤5例)作为对照组。本课题还利用免疫组化法比较研究了肿瘤组织中c-erbB-2、ER、PR的表达情况。 结果： 1、乳腺癌组和乳腺良性肿瘤组的肿瘤组织中HIF-1a表达情况。乳腺癌组HIF-1a阳性表达率为73.2％(41/56)，其中高表达率为41.1％(23/56)；乳腺良性肿瘤组HIF-1a的表达均为阴性(0/5，0/5，0/5)。HIF-1a蛋白在乳腺癌组织中的阳性率及高表达率均明显高于乳腺良性肿瘤组，差异有显著性(P值均小于0.05)。 2、乳腺癌患者生存情况与癌组织中HIF-1a表达的关系。根据乳腺癌患者的生存情况分为：生存期≤5年组24例和生存期>5年组32例。其HIF-1a蛋白表达率分别为79.2％(19/24)和68.8％(22/32)；其中HIF-1a蛋白的高表达率分别为70.8％(17/24)和18.8％(6/32)。两组的阳性表达率之间无显著性差异(P=0.384)，而高表达率之间却具有显著性差异(P<0.05)。根据乳腺癌组织中HIF-1a的表达情况分为：HIF-1a高表达组23例和HIF-1a低表达组33例。绘制Kaplan-meier生存曲线发现，HIF-1a高表达组生存率明显低于HIF-1a低表达组，差异有显著性(P<0.05)。 3、乳腺癌组织中HIF-1a的高表达与原发肿瘤直径有关。根据乳腺癌患者的肿瘤直径大小分为：肿瘤≤2cm组13例、2cm<肿瘤<15cm组27例和肿瘤>5cm组16例。其HIF-1a蛋白高表达率分别为7.7％(1/13)、48.1％(13/27)和56.3％(9/16)。三组之间有显著性差异(P=0.018)。其中2cm<肿瘤≤5cm组和肿瘤>5cm组明显高于肿瘤≤2cm组，差异有显著性(P值均小于0.05)；2cm<肿瘤≤5cm组与肿瘤>5cm组比较无显著差异(P=0.607)。 4、乳腺癌组织中HIF-1a的高表达与淋巴结转移有关。根据乳腺癌患者腋下淋巴结转移情况分为：腋下淋巴结无转移组15例、1～3枚转移组12例和4枚及以上转移组29例。其HIF-1a蛋白的高表达率分别为6.7％(1/15)、41.7％(5/12)和58.6％(17/29)。三组之间有显著性差异(P=0.002)。其中1～3枚转移组和4枚及以上转移组明显高于腋下淋巴结无转移组，差异有显著性(P=0.033；P=0.001)；1～3枚转移组与4枚及以上转移组比较无显著差异(P=0.322)。 5、乳腺癌组织中HIF-1a的高表达与临床TNM分期有关。根据乳腺癌患者的临床TNM分期分为：I期6例、Ⅱ期15例和Ⅲ期35例。其HIF-1a蛋白高表达率分别为0％(0/6)、33.3％(5/15)和51/4％(18/35)。三组间比较有显著性差异(P=0.024)。其中Ⅲ期组明显高于I期组，差异有显著性(P<0.05)；其它组间比较无显著差异(P值均大于0.05)。 6、乳腺癌组织中HIF-1a的高表达与恶性肿瘤组织学分级呈明显正相关。根据乳腺癌患者的肿瘤组织学分级分为：I级组9例、Ⅱ级组34例和Ⅲ级组8例，另有5例级别不明。其HIF-1a蛋白高表达率分别为0％(0/9)、47.1％(16/34)和87.5％(7/8)。Ⅱ级与Ⅲ级均明显高于I级，差异有显著性(P值均<0.05)；Ⅱ级与Ⅲ级之间无显著性差异(P=0.054)。 7、乳腺癌组织中HIF-1a高表达与肿瘤的病理类型、患者的月经情况及年龄无关。本实验中：浸润性导管癌组33例及浸润性小叶癌组18例HIF-1a蛋白分别为36.4％(12/33)，38.9％(7/18)。两组之间比较无显著性差异，(P=0.859)；未绝经组23例、已绝经组33例HIF-1a蛋白高表达率分别为34.8％(8/23)、45.5％(15/33)。两组之间无显著性差异(P=0.425)；年龄≤40岁组9例、40～60岁组34例和年龄≥60岁组13例HIF-1a蛋白高表达率分别为33.3％(3/9)，35.3％(12/34)，61.5％(8/13)。三组间比较无显著性差异(P=0.234)。 8、乳腺癌组织中HIF-1a高表达与ER表达的关系。根据乳腺癌患者肿瘤组织的ER表达情况分为：ER(-)组19例和ER(+)组37例。其HIF-1a蛋白高表达率分别为68.4％(13/19)和27.0％(10/37)。ER(-)组明显高于ER(+)组，有显著性差异(X<2>=8.887，P=0.003)。用Spearman相关分析判断HIF-1a蛋白高表达率与ER蛋白表达的相关性，乳腺癌组织中HIF-1a的高表达与ER蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.398，P=0.002)。 9、乳腺癌组织中HIF-1a高表达与PR表达的关系。根据乳腺癌患者肿瘤组织的PR表达情况分为：PR(-)组9例和PR(+)组47例。其HIF-1a蛋白高表达率分别为55.6％(5/9)和38.3％(18/47)。两组之间无显著性差异(P=0.552)。 10、乳腺癌组织中HIF-1a高表达与c-erbB-2表达的关系。根据乳腺癌患者肿瘤组织的c-erbB-2表达情况分为：c-erbB-2(+)组21例和c-erbB-2(-)组35例。其中c-erbB-2(+)组HIF-1a蛋白高表达率62.0％(13/21)，而c-erbB-2(-)组HIF-1a蛋白高表达率为28.6％(10/35)。C-erbB-2(+)组HIF-1a蛋白高表达率明显高于c-erbB-2(-)组，两组之间有显著性差异(X<2>=7.207，P=0.007)。用Spearman相关分析判断HIF-1a蛋白高表达率和c-erbB-2蛋白的相关性，乳腺癌组织中HIF-1a的高表达率与c-erbB-2蛋白的表达呈显著正相关(r=0.328，P=0.007)。绘制Kaplan-meier生存曲线，发现HIF-1ahigdc-erbB-2<,(+)>组的五年生存率明显低于其它三组[HlF-1ahigh/c-erbB-2(-)组、HIF-1a<,low>/c-erbB-2(+)组和HIF-1a<,low>/c-erbB-2<,(-)>组1(P值均小于0.05)，而其它三组间相比无显著差异(P=0.05)。 结论： 1、乳腺良性肿瘤组织中HIF-1a蛋白均呈阴性表达，乳腺癌组织中HIF-1a蛋白阳性表达率显著升高。 2、乳腺癌患者中，生存期≤5年组和生存期>5年组的HIF-1a蛋白阳性率之间比较无显著性差异，而HIF-1a蛋白在生存期≤5年组的高表达率明显高于生存期>5年组。提示乳腺癌组织中HIF-1a的高表达与预后差、生存期短显著相关，故HIF-1a的高表达可以作为临床判断预后的一项重要指标。 3、乳腺癌组织中HIF-1a的高表达与原发肿瘤直径有关，肿瘤直径>2cm的患者乳腺癌组织中HIF-1a高表达的阳性率显著高于直径≤2cm的患者；与淋巴结转移有关，腋下淋巴结有转移的患者乳腺癌组织中HIF-1a高表达的阳性率显著高于腋下淋巴结无转移组的患者；与临床TNM分期有关，Ⅲ期组HIF-1a蛋白高表达的阳性率明显高于I期组；乳腺癌组织中HIF-1a的表达与恶性肿瘤组织学分级呈明显正相关。所以HIF-1a的高表达是乳腺癌的危险因素，有助于判断肿瘤的侵袭性和转移能力。 4、乳腺癌组织中HIF-1a的高表达与c-erbB-2蛋白的表达呈显著正相关，与ER的表达呈显著负相关。HIF-1a蛋白与c-erbB-2蛋白同时阳性组的患者预后最差。进一步提示HIF-1a蛋白与c-erbB-2蛋白一样均为乳腺癌的危险因素，在乳腺癌的进展中可能具有协同作用。 5、乳腺癌组织中HIF-1a高表达的阳性率与PR的表达不相关，与肿瘤病理类型、患者年龄及月经状况亦无相关性。