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动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是危害人类健康的主要疾病之一，对于AS机制的研究一直是心血管疾病研究领域的热点。大量研究表明：AS是脂质代谢异常、血液凝集因子、细胞因子、血流动力学负荷、遗传、行为性危险因素以及可能的感染等多种因素互相作用的结果。其基本病理损害表现为一系列高度特异性的细胞及分子反应，符合慢性炎症疾病的特点。AS的早期病理损害，即所谓“脂质条纹”，主要由单核细胞源性巨噬细胞和T淋巴细胞组成，是一种典型的炎症病变。 CD40是一种分子量为49kDa的Ⅰ型跨膜糖蛋白，它可在B淋巴细胞、单核细胞、成纤维细胞、内皮细胞等多种细胞表面表达。CD40与其配体(CD40L)相互作用不只局限于炎症细胞之间信号传递，还参与AS内主要细胞成分(包括血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、巨噬细胞等)的炎症反应调节。但CD40及CD40L的上级调节机制目前仍不清楚。 过氧化物酶体增生激活型受体γ(PPARγ)是一种细胞核受体，在多种细胞(包括单核／巨噬细胞)和AS病灶等组织中均有广泛表达，参与多种物质的转录调节，可能与炎症反应的调节有关，但是否调节CD40的转录尚未见报道。 本研究试图通过观察在AS动物模型、配体或抗体刺激下、及人AS斑块破裂引起的急性冠脉事件中单核细胞／巨噬细胞膜受体CD40及其配体CD40L、核受体PPARγ表达水平的变化，探讨PPARγ对CD40／CD40L的调节作用及相关药物的影响，以期对AS的治疗提供理论依据。 主要方法：(1)采用高脂饮食+维生素D负荷法建立大鼠AS动物模型(AS组)，以正常饮食大鼠为对照组，并设辛伐他汀、罗格列酮(PPARγ激动剂，属于噻唑烷二酮类抗糖尿病药Thiazolidinediones，TZDs)干预组(每组10只)，心脏采血测定各组大鼠血清脂质；取大鼠主动脉标本行HE染色、电子显微镜观塑堕塑型进竺堕巡丝~竺竺二色竺竺竺些匕丝担型燮鱼一一--一一丝丝兰察、CD40和PPARY免疫组化研究;腹腔灌洗法收集各组大鼠腹腔巨噬细胞，以p激动蛋白(p一actin)为内参照，逆转录聚合酶链式反应(RT一PcR)测定各处理组大鼠腹腔巨噬细胞CD40、CD40L、PPAR Y mRNA表达水平的变化。(2)培养人单核细胞系u937，分别以天然PPARY激动剂巧一脱氧前列腺素J2 (15d一PGJZ)、PPARY多克隆抗体(PPARYAb)、重组人CD40L(rCD4OL)、CD40多克隆抗体(CD40Ab)刺激后，RT-PcR法测定各处理组细胞表达的PPARY和CD40 mRNA水平变化，Western一Blot法观察各处理组细胞PPARY和CD40蛋白水平变化。(3)按对照组(CON)、冠心病稳定性心绞痛组(s AP)、不稳定性心绞痛组(UAP)、急性心肌梗死组(AMI)分组(每组20例)，采集相关生化指标和临床血标本，分离血单核细胞，RT-PCR法检测细胞CD4O/CD4OL、P队RY mRNA水平变化。 结果:(1) AS组大鼠血脂水平(总胆固醇、LDL一C)明显高于辛伐他汀、罗格列酮干预组，此三组血脂水平明显高于正常对照组;(2)光镜下见AS组大鼠主动脉平滑肌细胞增生明显，肌细胞排列紊乱，弹性纤维层结构不清，纤维斑块向管腔突出，电镜下见内皮细胞核扭曲，内皮下胶原纤维增生;(3)大鼠主动脉壁免疫组化显示:正常对照组不表达CD40，AS组表达明显增多，辛伐他汀或罗格列酮干预后表达减少;AS组P刃以Y表达减少，罗格列酮干预后表达明显增加;(4)RT-PCR研究提示:AS组大鼠腹腔巨噬细胞CD40和CD40L mRNA表达(分别为0.957士0.238和0.730士0.177)明显高于正常对照组(分别为0.510士0.164、0.398士0.128，P(0.01)和药物干预组(辛伐他汀干预组分别为0.762士0.155、0.616士0.174;罗格列酮干预组分别为0.890士0.210、0.541士0.124，P<0.05)，而罗格列酮干预组P队RY(0 .663士0.146)表达明显高于其他各组(正常对照组、AS组、辛伐他汀干预组分别为0.390士0.141、0.360士0.119、0.518士0.1 13);(5)rCD40L或CD40Ab处理U937细胞后，与对照组相比(0.533士0.090)，细胞CD40 mRNA表达量分别增加(0.933士0.176，P<0.01)和减少(0.387士0.079，P<0.05)，但PPAR Ym丑刊A表达量无明显变化;而15d一pGJZ或PPARYAb处理细胞后，与对照组相(0 .588士0.088)比，细胞P队R Y mRNA表达量分别增加(0.775士0.127，P<0.05)和减少(o.4ox士0.062，p<0.05)，同时CD40 mRNA表达量分别减少和增加，2 sd一PGJZ刺激后PPARY表达增加，CD40动脉粥样硬化单核/巨曦细胞PP人R丫和CD4O/CD4OL的相关性研究中文摘要表达降低，两者呈负相关(r=0.9518，P<0.01)，提示PPARY增高可能抑制CD4O的表达;W七stem一Blot法观察到蛋白质水平有类似变化;(6) AMI组和UAP组白细胞总数、血糖、尿酸、胆固醇、LDL一C明显高于CON组和SAP组，P<0.05;CD40、CD40L mRNA表达明显增高(AMI组分别为0.774士0.251、0.582士0.168，UAP组分别为0.707士0.108、0.513士0.156，SAP组分别为0.580士0.125、0.392士0.112，CON组分别为0.538士0.132、0.323士0.107)，P<0.05;PPARYmRNA表达明显降低(AMI组0.391士0.101，UAP组0.396士0.093，SAP组0.555士0 .1 52，CON组0.625士0.223)，P<0.05。 结论:(l)高胆固醇饮食+维生素D3负荷可复制出早期AS大鼠动物模型，辛伐汀类或罗格列酮可以减轻大