【摘 要】
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抑制素α（INHβ）是TGFβ超家族的成员之一、生殖功能的重要调节剂,在卵泡发育、细胞分化以及卵母细胞发育过程中发挥重要的作用,从而影响动物的繁殖性能。为研究INH α在动物繁殖中作用与机理,在本实验室前期研究中,利用shRNAi技术分别构建了水牛INH α基因RNAi-B和小鼠INHα基因RNAi-M,并分别获得了INH α基因沉默的RNAi-INH α转基因小鼠（RNAi-B转基因小鼠和RNA
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抑制素α（INHβ）是TGFβ超家族的成员之一、生殖功能的重要调节剂,在卵泡发育、细胞分化以及卵母细胞发育过程中发挥重要的作用,从而影响动物的繁殖性能。为研究INH α在动物繁殖中作用与机理,在本实验室前期研究中,利用shRNAi技术分别构建了水牛INH α基因RNAi-B和小鼠INHα基因RNAi-M,并分别获得了INH α基因沉默的RNAi-INH α转基因小鼠（RNAi-B转基因小鼠和RNAi-M转基因小鼠）；本试验以该转基因小鼠为对象开展研究,主要结果如下：（1）转基因小鼠的INH α基因表达的分析：转基因小鼠的INH α基因的mRNA转录表达水平和蛋白翻译水平都受到了干扰抑制,其中RNAi-M转基因小鼠的INHα基因mRNA表达水平的抑制率为64%、RNAi-B抑制率为44%；由于RNAi-M转基因小鼠的INHα基因抑制水平较高,而且RNAi-M是根据小鼠INHa基因序列设计的,故选择RNAi-M转基因小鼠作为对象开展以下研究的：（2）转基因小鼠的产仔性能的探讨：RNAi-M转基因小鼠的F1代产仔数呈下降的趋势（P<0.05）, RNAi-M转基因小鼠平均产仔为6.2±0.79只,野生型对照组平均产仔为9.8±0.16只；（3）转基因小鼠的发情的分析：RNAi-M转基因小鼠发情期（29.44±0.38天）显著地比野生型（27.11±0.49天）长（P<0.05）；（4）转基因小鼠的生殖激素的分析：对RNAi-M转基因雌鼠血液中INH α和FSH的浓度进行了测定和分析,血清中INH α水平在3和6周龄呈现显著下降（P<0.05）；FSH在3周显著增加（P<0.05）,而6周FSH浓度变化不显著。（5）转基因小鼠的排卵数的探讨：进一步对RNAi-M转基因小鼠排卵数进,结果表明RNAi-M转基因小鼠的排卵数也有所减少；（6）转基因小鼠的颗粒细胞生长发育的分析：RNAi-M转基因小鼠显著地降低了卵巢颗粒细胞GCs的细胞周期G1期和S期细胞的数量（P<0.05）;（7）转基因小鼠的颗粒细胞凋亡的研究：与野生型对照组相比,RNAi-M转基因小鼠显著地提高了卵巢颗粒细胞GCs的凋亡水平（P<0.05,由3.40%提高到9.70%）；（8）转基因小鼠的颗粒细胞相关基因表达的研究：RNAi-M转基因小鼠抑制了卵巢颗粒细胞GCs的INH α的转录和翻译水平,从而显著促进了细胞凋亡相关Caspase-3、BCL2、INH βB和GDF9基因的表达、降低了kitl和TGFβR Ⅲ基因的表达；综合上述试验结果：（1） INH α基因表达受到了强烈抑制（如本试验的64%）,从而改变了卵巢颗粒细胞中重要基因的正常表达,导致了卵巢颗粒细胞生长发育、卵巢排卵、生殖激素分泌的紊乱,抑制了小鼠的发情和产仔数性能；（2） INH α基因虽然具有抑制FSH等重要激素分成分泌、负调控动物繁殖性能,但在动物体内还是要维持一定的表达水平和发挥其重要作用,不能过度地抑制INHα基因的表达和功能；（3）还需要进一步探讨动物体内适宜的INH α基因的表达水平,从而通过调控INH a基因的表达来提高动物繁殖性能。
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