RhoC基因沉默联合雷帕霉素对肝癌细胞Survivin表达水平的影响

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目的:原发性肝癌是世界上恶性程度最高的肿瘤之一,大多数患者出现症状时已晚期,因此肝癌患者有生存率低、病死率高的特点。已有很多学者在原发性肝癌的分子事件方面做了大量的研究。其中研究最多的分子机制为信号传导通路。Rho与PI3K/Akt/mTOR是与肝癌细胞的生长、侵袭、转移及凋亡有关的两个信号传导通路。Survivin基因是目前研究最多的抗凋亡因子,本实验通过基因沉默RhoC联合雷帕霉素阻断mTOR通路对肝癌细胞Survivin表达水平的实验研究,证明二者联合能显著促进肝癌细胞的凋亡,并为寻找治疗肝癌的新分子靶点提供实验依据。方法:实验分为6组:空白对照BEL7402组、阴性对照Scramble-siRNA组、阴性对照Scramble-siRNA+Rapa组、Rapa组、RhoC-siRNA组、RhoC-siRNA+Rapa组。Western Blot方法鉴定RhoC蛋白的基因沉默效果,半定量RT-PCR法检测抗凋亡相关因子Survivin在mRNA水平上的表达,免疫化学细胞法检测Survivin的表达。结果:各实验组Survivin的表达情况:Scramble-siRNA+Rapa组、Rapa组、RhoC-siRNA组和空白对照BEL7402组、阴性对照Scramble-siRNA相比Survivin表达降低(P<0.05),RhoC-siRNA联合Rapa组Survivin的表达显著降低(P<0.01);说明Scramble-siRNA+Rapa组、Rapa组、RhoC-siRNA组抑制肝癌细胞Survivin的表达(P<0.05),而RhoC-siRNA联合Rapa组显著抑制肝癌细胞Survivin的表达(P<0.01)。结论:RhoC-siRNA联合雷帕霉素能明显抑制抗凋亡因子Survivin的表达。
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