目的:本研究通过冈田酸(Okadaic acid,OA)诱导人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)内TAU蛋白过度磷酸化,建立阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)病理机制体外细胞模型,在此基础上研究人嗅黏膜间充质干细胞(human Olfactory Mucosa mesenchymal stem cells,h OM-MSCs)共培养对AD细胞模型的治疗效果,为h OM-MSCs用于AD治疗提供理论和实验依据。方法:1.SH-SY5Y细胞复苏,待细胞性状良好,密度满意后进行传代培养;2.用不同浓度OA(0、10、20、30、40nmol/L)处理SH-SY5Y细胞不同时间(8h、24h)后,通过观察细胞形态、检测细胞凋亡率、免疫荧光观察细胞微丝、微管结构以及免疫印迹法(WB)检测细胞内磷酸化TAU(PTAU)蛋白的含量变化来确定AD造模最适合的OA浓度及处理时间;3.鼻内镜下获取人嗅黏膜组织块,组织剪碎贴壁后进行h OM-MSCs原代培养,镜下观察,待细胞形状良好,密度满意后传代培养;4.按照摸索出的最适OA处理时间及浓度进行随机分组实验造模(对照组、造模组、治疗组),并在治疗组中将h OM-MSCs移植于transwell装置上室与造模成功的AD细胞共培养,然后与对照组、造模组进行对比检测;5.通过观察细胞形态、免疫荧光结果以及免疫印迹法检测细胞内P-TAU蛋白的含量变化来分析h OM-MSCs对于造模后AD细胞的治疗效果。结果:1.根据观察细胞形态、检测凋亡率、免疫荧光结果以及WB结果分析,OA损伤处理后细胞与对照组有明显差异,表现为细胞凋亡率上升,细胞形态发生改变,细胞变圆、树突缩短、微管纤维束变细,这些差异随着OA浓度增加、处理时间加长更加明显,同时细胞内P-TAU含量明显上升,OA浓度为30nmol/L时达到峰值;2.h OM-MSCs与造模后的SH-SY5Y细胞共培养后,相较于未进行共培养的造模组,细胞形态开始恢复正常化,树突重新开始伸长,微管纤维束开始增粗,细胞内P-TAU含量明显下降趋于正常。结论:1.诱导SH-SY5Y细胞进行AD细胞造模,造模剂OA以浓度30nmol/L,造模时间24h为最佳标准;2.h OM-MSCs共培养对于OA诱导损伤SH-SY5Y细胞建立的AD模型细胞有治疗作用。