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摘要:滇西北地区是全球生物多样性重点保护地区，拥有3处国际重要高原湿地（拉市海、纳帕海和碧塔海）。这些湿地在保护这一地区生态环境方面发挥了积极作用。近年来有研究表明，人为活动干扰对纳帕海湿地环境产生了显著影响，使纳帕海湿地植物种类和植被覆盖率锐减，生态系统不断退化，环境质量日趋恶化。所以对该地区进行生态恢复研究已迫在眉睫，而对该地区的野生水生植物进行保护性繁殖和恢复则是进行湿地生态恢复的有效手段。在恢复水生生态系统工程中，通常采用从异地采集水生植物的方法来恢复当地水生植被，此法虽然效果显著，却是一种拆东墙补西墙的作法，不能解决根本问题。而植物组织培养技术是一项成熟的生物技术，可以快速的为相关研究提供大量植物材料。本研究通过试验建立了水葱（Scirpus tabernaemontani）和水毛茛（Batrachiumbungei）的组培体系；对刘氏荸荠（Eleocharis liouana）、杉叶藻（Hippuris vulgaris）、荇菜（Nymphoides peltatum）、狐尾藻（Myripophyllum spicatum）、三裂叶碱毛茛（Halerpestes tricuspis）共5种水生植物的增殖培养基配方进行优化，并对最佳的移栽季节进行筛选。对刘氏荸荠和杉叶藻的最佳水培营养液进行筛选。为水生植物的工厂化育苗和滇西北地区湿地植被恢复奠定了基础，对滇西北地区受损湿地生态系统的恢复起到了积极作用。研究结果如下：（1）水葱外植体消毒方法为：将芽冷藏处理48h后，用70%乙醇处理30s，再用0.1%升汞处理8min。最佳增殖培养基配方为：1/2MS+6-BA2.0+IBA0.02mg/L，加糖20g/L，增殖系数达12.17。最佳生根培养基配方为：MS+AC1g/L、MS+IBA0.01mg/L，生根率分别达100%、85%。炼苗移栽成活率达100%。（2）水毛茛外植体消毒方法为：用70%酒精浸泡30s后在0.1%升汞溶液中消毒4min，污染率为6%。最佳丛芽诱导培养基配方为：MS+6-BA0.5+IBA0.1mg/L，丛芽诱导率达到66.7%。最佳增殖培养基配方为：1/2MS或MS+6-BA0.05+KT0.01+IBA0.01mg/L，培养周期为20d，增殖率达到86.67%。最佳的丛芽诱导培养温度为25℃，最佳的培养方式为液体培养。最适生根培养基配方为：MS+IBA2.0mg/L，生根率达72%。移栽成活率达63.3%。（3）在杉叶藻、刘氏荸荠、荇菜、穗状狐尾藻和三裂叶碱毛茛，5种植物的简化培养中，用食用白砂糖代替分析纯蔗糖作为碳源，将购买碳源的成本降低到原来的21.43%；去掉配方中的山农一号，使每升培养基的配制成本降低4.5元；筛选出了5种植物的最佳培养温度。（4）刘氏荸荠优化后的增殖培养基配方为：MS+IBA0.5+6-BA1.5～3.0mg/L，增殖系数13.6～17.1，培养周期为30d，苗高达到3cm。（5）杉叶藻最佳腋芽诱导培养配方为：1/2MS+6-BA1.0+TDZ1.0+IBA0.5mg/L，诱导时间为3～5d，诱导培养基可重复利用。最佳增殖培养配方为：MS+6-BA3.0+IBA0.5+KT0.05mg/L，培养周期为30d，增殖系数达12。（6）荇菜优化后的增殖培养基配方为：1/3MS+6-BA0.05～3.0+IBA0.05+KT0.5mg/L，增殖周期为25d，增殖系数为5.2～6.5。（7）三裂叶碱毛茛的玻璃化：通过去掉6-BA和所有激素，结合降低培养温度到20±2℃，可以有效的控制玻璃化。三裂叶碱毛茛增殖培养基配方为：MS+6-BA0～0.05+KT0.1+NAA0.1mg/L，培养周期为20d，增殖系数为5～6.9。（8）穗状狐尾藻最佳增殖培养基配方为：MS+6-BA0.5+NAA0.1mg/L，增殖周期为20d，增殖系数达36。增殖阶段可以和生根阶段合并。（9）炼苗移栽试验：春、夏、秋三个季节适于刘氏荸荠、荇菜和穗状狐尾藻的移栽，成活率达到100%；而春、夏两季适于杉叶藻和三裂叶碱毛茛的移栽。（10）基质栽培的营养液筛选：山崎配方为穗状狐尾藻和刘氏荸荠最佳移栽营养液配方。斯泰纳配方是杉叶藻最佳移栽营养液配方。园试配方为荇菜最佳移栽营养液配方。三裂叶碱毛茛组培苗在移栽阶段不用浇营养液。（11）杉叶藻和刘氏荸荠组培苗最合适的水培营养液配方为园试配方；用浓度为100mg/L的IBA浸泡组培苗30min有利于杉叶藻和刘氏荸荠组培苗的水培培养。