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本研究利用植物转录因子数据库获取马铃薯和拟南芥bHLH基因家族蛋白及基因序列,对马铃薯bHLH TFs进行了生物信息学分析、研究了14个StbHLHs在马铃薯DM中响应干旱胁迫和盐胁迫的表达模式的,并进行了StbHLH1基因克隆及功能分析。主要结果如下:1、使用植物转录因子数据库获得了206个马铃薯bHLH转录因子。StbHLH蛋白平均氨基酸数为519.8。基因结构结果表明大多数的StbHLHs基因不含有内含子,其中StbHLH82含有2个内含子,StbHLH29、StbHLH45、StbHLH115、StbHLH129、StbHLH136、StbHLH157、StbHLH197含有1个内含子。所有StbHLHs基因不均匀的分布在12条染色体上,其中3号染色体基因分布数量最多为27个,11号染色体基因分布数量最少为4个。根据系统进化树结果选取了14个响应干旱胁迫的StbHLHs基因。2、通过qRT-PCR分析了14个StbHLHs基因在干旱胁迫和盐胁迫下马铃薯DM中的表达模式。干旱胁迫:12 h和24 h时StbHLH194在叶组织中的表达量上调。在根组织中,StbHLH11在处理12 h和24 h时表达量下调,但24 h时表达量高于12 h的;在茎组织中,StbHLH11在处理12 h和24 h时表达量下调,但24 h时表达量高于12 h的;StbHLH54在处理12 h表达量下调,但24 h时表达量上调;但同一基因在不同的组织中对逆境的调节是不同的。3、克隆了SWS2中的StbHLH1基因。StbHLH1 CDS全长2046bp,可编码蛋白质氨基酸残基的数目为682个,其分子量75592.74 Da,亚细胞定位于细胞核。利用String在线软件分析得到与其互作的蛋白PGSC0003DMT400036281、PGSC0003DMT400021018、P、PGSC0003DMT400008569和AN11,其中PGSC0003DMT400008569和AN11也存在互作。4、StbHLH1基因的表达载体构建。利用BP反应将StbHLH1基因CDS序列连接到中间载体pDONR207中,获得pDONR207-StbHLH1;其次,将BP反应中获得的质粒与表达载体pJAM1502进行重组,获得表达载体pJAM1502-StbHLH1。测序后,提取质粒并通过冻融法转入根癌农杆菌(AGL1)。5、烟草转基因植株的获得。为鉴定StbHLH1基因在植株中的功能,将构建的植物表达载体pJAM1502-bHLH1利用农杆菌侵染法转化烟草。提取转StbHLH1烟草和野生型烟草的DNA,用于半定量PCR。结果得到54株转化幼苗,其中27株阳性幼苗,阳性率为50%。并进行失水率测定,发现转StbHLH1烟草的保水性比野生型高。