红酵母中活性成分的研究——类胡萝卜素的工艺优化及红酵母细胞壁的应用

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红酵母菌株中含有多种生物活性成分,如类胡萝卜素能用于食品着色剂、化妆品添加剂、抗氧化药物制剂、饲料添加剂的生产:而其细胞壁因具有激发增强免疫的功能,可用于生产绿色免疫饲料添加剂。鉴于我国对各种功能性食品及饲料添加剂的日益增长地需求,同时考虑到红酵母具有天然无毒,廉价易得的优势,我们对红酵母发酵产类胡萝卜素及其细胞壁作为饲料添加剂的应用进行了研究。 本文首次运用响应面法对高产类胡萝卜素产生菌红酵母菌株D的液体发酵培养基进行了优化。Plackett-Burman试验得到酵母膏、硫酸铵和蔗糖为主要影响因子。中心组合实验和响应面法得到最佳优化发酵培养基组成为酵母膏4.173g/L,(NH4)2S0413.594g/L,蔗糖60.533g/L,MgSo4 0.3g/L,K2HP04 0.10g/L核黄素0.004g/L.在此条件下红酵母产类胡萝卜素的最大产量为15.385mg/L,较原始培养基的类胡萝卜素产量提高了58.65%。 对红酵母菌株D产类胡萝卜素提取工艺进行了优化研究。破壁方法筛选试验表明酸热法是破碎红酵母细胞壁的较好方法。单因子实验、析因子试验、最陡爬坡实验和中心组合设计实验优化得到了最佳的类胡萝卜素提取条件:溶剂添加量为42.66%(V/V),丙酮与二甲亚砜组成比例为62.47%(V/V),温度为20℃,提取时间为90min。在此条件下类胡萝卜素的提取量提高了31.25%。 以红酵母细胞壁作为饲料添加剂,进行了肉仔鸡的喂养实验,验证和评价了红酵母细胞壁作为功能饲料在肉鸡生长和免疫力方面的功效和价值。结果表明:红酵母细胞壁是一种良好的免疫饲料添加剂。在一定添加范围下,随着红酵母细胞壁添加量的加大,肉仔鸡的日增重、转化率、肉仔鸡脾脏、法氏囊等免疫器官的相对重量,21日龄和42日龄血清中溶菌酶的浓度均逐渐增加,并存在正相关的关系, 2000mg/kg为红酵母细胞壁最佳添加量。 动态多水平测定了不同营养条件下红酵母产类胡萝卜素的产量与其细胞壁主要活性成分的含量。分析表明:红酵母细胞壁中B-1,3-D-葡聚糖、甘露聚糖的含量与类胡萝卜素产量间均存在正相关的关系。这对类胡萝卜素和细胞壁功能多糖合成代谢途径的深入研究,红酵母经济价值的开发具有深远意义。
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