【摘 要】
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目的本课题通过建立氧诱导视网膜病变(OIR)SD大鼠模型,观察高氧诱导的新生血管病理改变,并通过向玻璃体内注射贝伐单抗,观察贝伐单抗对大鼠视网膜新生血管是否具有抑制作用,
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目的本课题通过建立氧诱导视网膜病变(OIR)SD大鼠模型,观察高氧诱导的新生血管病理改变,并通过向玻璃体内注射贝伐单抗,观察贝伐单抗对大鼠视网膜新生血管是否具有抑制作用,及其抑制效果与药物剂量的关系。方法选择正常分娩后7天的SD幼鼠120只,体重(12-16g),随机分为8组,每组15只,雌雄兼有。一组作为正常对照组,剩余7组在(75±2)%的高氧环境中饲养5天,再回到空气中饲养7天。幼鼠离开高氧环境的同时,3个贝伐单抗给药组分别给予幼鼠左眼玻璃体腔注射不同剂量的贝伐单抗(1μL,5μL,10μL),3个高氧BSS组幼鼠给予左眼单纯无菌BSS液玻璃体腔注射,剂量同贝伐单抗组。高氧组只做高氧处理。在离开高氧环境7天(即鼠龄19天)时,观察角膜、晶体透明度,每组中随机取3只幼鼠,制作视网膜铺片,观察左眼视网膜血管形态。剩余12只幼鼠摘除左眼眼球,石蜡包埋做病理切片,行HE染色,计数突破内界膜的视网膜新生血管数目。结果1突破内界膜血管内皮细胞计数HE染色法行突破内界膜血管内皮细胞计数,高氧照突破内界膜的新生血管内皮细胞数目(31.32±0.61),明显多于正常对照组幼鼠(1.08±0.38),两组结果经统计学分析差别有显著性意义(p＜0.01);贝伐单抗注射三剂量组幼鼠突破内界膜的新生血管内皮细胞数目分别为(14.27±1.25)、(9.86±0.93)、(6.58±0.87),均明显少于高氧BSS组(31.97±0.26)、(32.08±0.31)、(31.59±0.79),经统计学分析两两比较结果差别有显著性意义(p＜0.01);贝伐单抗注射组幼鼠两两比较均具有显著统计学意义(p＜0.01)。2视网膜血管形态观察采用Evans蓝灌注血管造影法进行视网膜铺片。正常对照组视网膜血管自视盘向四周均匀放射,分支良好,管径较粗,周边网膜分支好,结构清晰,未见明显紊乱弯曲;高氧组、高氧BBS组及贝伐单抗1μL治疗组12天时可见自乳头发出新生血管,向周边走行时突然收缩、闭塞,形成无灌注区,周边血管密度增加,可见渗漏;贝伐单抗治疗5μL,10μL组,血管发育接近于空气对照组,较高氧组及高氧BSS组健康,且随着剂量的增加,新生血管明显减少。3给药组小鼠体重与其他组比较,体重变化未见明显异常。4 CD34免疫组化显示高氧对照组幼鼠视网膜组织切片突破内界膜的细胞为血管源性。结论1氧诱导视网膜病变(OIR)SD大鼠模型建立成功。2玻璃体腔注射贝伐单抗可抑制新生血管的产生,并且随着药物剂量的增加,抑制作用更加明显。3玻璃体腔注射贝伐单抗短期内不会影响幼鼠的生长发育。
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