促红细胞生成素对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及机制

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目的:本研究采用大鼠肾缺血再灌注损伤模型,探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin, rHuEPO)对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用,并对其可能机制进行初步研究。方法:雄性Wistar大鼠72只,随机分为三组:(1)假手术组(N=24),按取材时间不同又分为4个小组,即相当于再灌注1h、6h、12h、24h取材组,每组6只;(2)肾缺血再灌注损伤模型组(N=24),组内又分为再灌注1h、6h、12h、24h 4个时间点,每个时间点6只;(3) rHuEPO组(N=24),组内又分为再灌注1h、6h、12h、24h 4个时间点,每个时间点6只。将动物麻醉,开腹,假手术组切除右肾,不夹闭左肾动脉,模型组和rHuEPO处理组切除右肾,夹闭左肾动脉45min后松夹再灌,rHuEPO处理组在再灌注开始前尾静脉注射rHuEPO3000U/Kg,假手术组和模型组在再灌注开始前尾静脉注射等量生理盐水。再灌注达相应时间点时,从各小组大鼠下腔静脉取血3ml备测血尿素氮(BUN)和血肌酐(Cr),然后迅速切除左肾,称取0.5克肾组织迅速冷冻,待作成10%组织匀浆,测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO),其余肾组织用10%甲醛固定,制备石蜡切片,作HE染色观察病理变化以及作免疫组化分析肾组织P-选择素和ICAM-1表达情况。结果:(1)肾功能改变:模型组除再灌注1h组血BUN无明显升高外,其余各小组BUN、Cr较假手术组明显升高(P<0.01),rHuEPO处理组除再灌注1h组BUN与假手术组无明显差异外,其余各小组BUN较相应时间点假手术组明显升高(P<0.05,P<0.01),rHuEPO处理组中再灌注1h,12h,24h组血Cr较假手术组明显升高(P<0.05,P<0.01),而再灌注6h组血Cr与假手术组无显著差异。与肾IRI模型组比较,rHuEPO处理组再灌注6h、12h、24h组BUN、Cr明显降低(P<0.01,P<0.05),rHuEPO处理后再灌注1h组血BUN和Cr与模型组无明显差异。(2)肾组织生化指标检测结果:肾组织MDA、SOD测定结果:与假手术组比较,模型组各组肾组织MDA含量均明显升高(P<0.05,P<0.01),而各组肾组织SOD活力均显著降低(P<0.05,P<0.01),rHuEPO处理组除再灌注24h组MDA含量较假手术
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