本研究基于酶法分析中的酶抑制原理,对农药残留检测用植物酯酶制剂进行研究。首先以传统植物酯酶提取材料小麦为实验材料,设计单因子试验,筛选并优化提取液种类、料液比、提取时间、离心速度等条件,得到植物酯酶的最佳提取工艺。然后扩大植物酶源的选材范围,通过对11种植物种子及2种植物加工材料总酯酶活力与比活力进行比较,筛选农药残留检测用适宜的植物酯酶。将该植物酯酶与家蝇乙酰胆碱酯酶进行比较,确定其开发利用的价值。用该酯酶对6种有机磷及氨基甲酸酯类农药敌敌畏、辛硫磷、敌百虫、速灭威、克百威、灭多威进行敏感性分析,确定其开发利用的可行性。最后对该酯酶进行初步的纯化和固定化,为植物酯酶制剂的开发奠定基础。其主要研究结果如下:1.植物酯酶的适宜提取工艺:当年生新鲜植物种子或材料,粉碎(过100目筛),按料液比1:5,加入0.2mol/L、pH6.5的磷酸盐缓冲液, 4℃下浸泡16h,4层纱布过滤,4℃下,10000r/min离心10min。2.在小麦、油菜、萝卜、花生、黄豆、绿豆、芸豆、红小豆、冰豆、葵花籽、花豇豆11种植物种子及面粉、麦麸和家蝇等材料中,花豇豆的总酯酶活力及比活力极显著高于其它植物酯酶和家蝇。其总酯酶活力为14.695U,比活力为1.219 U/mg,而且易于获取,提取方便,成本低,故以此作为农药残留检测用植物酯酶是适宜的。3.用花豇豆酯酶对6种有机磷及氨基甲酸酯类农药敌敌畏、辛硫磷、敌百虫、速灭威、克百威、灭多威的敏感性测定分析得出:花豇豆酯酶对有机磷类农药敌百虫的敏感性最好,其次为对敌敌畏的敏感性,对辛硫磷的敏感性最低,而对氨基甲酸酯类农药的敏感性普遍较低,所测农药的浓度与对花豇豆酯酶抑制率间相关性较好,决定系数都在0.9423以上,符合检测要求。4.花豇豆酯酶经初步纯化后,比活力和纯化倍数都有所提高。60%硫酸铵沉淀分离得到的花豇豆酯酶,比活力为原来的2.743倍,活性回收率为原来的2.420倍,经透析浓缩后比活力为原来的4.214倍,活性回收率为原来的3.460倍。5.花豇豆酯酶的最佳固定化温度为4℃,固定时间为8h,-20℃黑暗条件下夹在保鲜膜中保存效果最好,至少可保存60d,并且仍能维持80%酶活力。