单眼形觉剥夺大鼠反缝治疗前后视中枢nNOS的表达

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目的:本课题运用NOS Ⅰ型(神经型一氧化氮合酶,nNOS)抗体,通过nNOS在单眼形觉剥夺大鼠背外侧膝状体(dLGN)和视皮层17区反缝治疗前后的表达变化,探讨关键期内剥夺性弱视治疗前后视中枢神经元功能状态的改变。进一步论证NO在视觉发育可塑性及剥夺性弱视发病机制中的作用,以助于在分子水平阐明弱视的发病机理,为弱视的预防和治疗提供一条新的途径。 方法:1、动物模型的建立与分组:14日龄健康雄性SD大鼠接受左眼眼睑缝合手术造成剥夺性弱视模型,术后2周打开左眼并行对侧眼(右眼)眼睑缝合进行遮盖治疗。动物分为三组:剥夺组(Monocular Deprivation,MD)12只,于14日龄时缝合左眼眼睑,再分为Ⅰ、Ⅱ2个小组,MD(Ⅰ)于术后2周(28日龄)、MD(Ⅱ)于术后4周(42日龄)处死;治疗组(Reverse Suture,RS)6只,42日龄时处死;正常对照组(Normal Control,NC)12只,分为2小组,NC(Ⅰ)6只于28日龄时处死、NC(Ⅱ)6只于42日龄时处死。 2、标本获取与制备:4%多聚甲醛经快速左心室升主动脉插管灌注固定后开颅取出脑组织,冰冻切片机上冠状切片,贯穿整个dLGN与视皮层17区,厚度40μm。视皮层17区每个标本每隔3张切片取一张行Nissl染色。
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