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本研究从植物根际土壤中分别筛选出固氮菌、水解有机磷细菌和水解不溶性无机磷细菌,将它们与能拮抗层出镰孢菌的甲基营养型芽孢杆菌混合,以玉米秸秆为基质进行固态发酵,通过单因素试验和响应面法得到固态发酵营养体最高活菌数的适宜条件,制备出一种新型复合微生物菌肥。同时,利用制备的复合微生物菌肥烟草栽培试验,通过对烟草生长特性和抗病能力的测定,检验其应用效果。论文研究从植物根际土壤中,通过筛选分别得到固氮菌N3、水解有机磷细菌Y1、水解不溶性无机磷细菌W3,其16S rDNA鉴定结果分别为Arthrobacter sp.ZSH N3、Enterobacter asburiae ZSH Y1、Enterobacter hormaechei ZSH W3,在CGMCC的保藏编号分别为1.18471、1.18470和1.18469。采用平板对峙培养法筛选出对层出镰孢菌镰刀菌(Fusarium proliferatum)拮抗效果良好的甲基营养型芽孢杆菌KY2(Bacillus methylotrophicus KY2)当作生防菌使用。通过十字交叉法得知,固氮菌N3、水解有机磷细菌Y1、水解不溶性无机磷细菌W3、生防菌KY2相互间无拮抗作用。选取玉米秸秆作为基础固态基质,利用添加沼液和接种里氏木霉RUT-C30(Trichoderma reesei)菌悬液的方式对玉米秸秆进行预处理,再接种固氮菌N3、水解有机磷细菌Y1、水解不溶性无机磷细菌W3、生防菌KY2混合菌悬液,发酵一定时间后制备出新型复合微生物菌肥。通过单因素实验和响应面法得到固态发酵营养体最高活菌数的适宜条件,在发酵条件为温度30.4℃、初始pH 7.7、初始含水量100%、接种量15.5%、接种间隔时间12 h、发酵时间120 h的情况下,菌肥中固氮菌N3、水解有机磷细菌Y1、水解不溶性无机磷细菌W3、生防菌KY2实际有效活菌数分别达到2.27×109、3.11×109、7.10×108和3.21×109 CFU·g-1,总氮和有效磷含量分别为原材料的6.07倍和11.43倍。选取烟草作为供试植株,进行盆栽实验验证复合微生物菌肥的功效。盆栽实验结果得出,施用该复合微生物菌肥既能显著提高烟草植株的生长特性、促进烟草叶片的光合作用,以及增加烟草叶片的营养成分,还能有效提高盆栽基质的营养成分含量、改善盆栽基质的微生物群落结构,并且有效防治烟草层出镰孢菌枯萎病。综上,论文完成了固氮菌N3、水解有机磷细菌Y1、水解不溶性无机磷细菌W3、生防菌KY2的筛选及鉴定,通过固态发酵,制备出新型复合微生物菌肥。通过烟草盆栽实验,显示出复合微生物菌肥的良好功效,可进一步产业化推广。