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目的：克隆家蝇外切多聚磷酸酶（PPX）片段基因的cDNA序列，并对PPX基因进行生物信息学分析，构建该基因的原核表达载体。 方法：根据已知抗菌肽N端氨基酸序列设计简并引物，采用3’race技术对其进行序列延伸；根据3’race结果设计引物，扩增家蝇 PPX基因序列并对其进行生物信息学分析，构建家蝇PPX基因重组原核表达质粒并鉴定。 结果：家蝇PPX基因的cDNA长660bp，编码219个氨基酸。生物信息学分析显示家蝇PPX是一个分子量24.7867kD，等电点为8.4，不稳定参数45.58，脂溶指数99.27，不具跨膜区和信号肽的亲水蛋白。其主要构成元件为α螺旋、β折叠和无规则卷曲及少部分的β转角。三维结构预测显示该蛋白高度复杂卷曲。系统同源性分析显示PPX基因在进化过程中高度保守。根据克隆的家蝇 PPX基因成功构建 PPX基因的原核表达载体，获得融合组氨酸（HIS）标签的pET28a（+）-PPX重组质粒。 结论：成功克隆家蝇PPX基因，并对其蛋白质结构及功能进行预测；基于克隆出的PPX基因，成功构建家蝇PPX基因原核表达载体，为今后进一步研究家蝇PPX基因的功能奠定了基础。