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随着微波技术的广泛应用,人们对微波开展了大量的研究,探讨微波的生物学作用。眼睛是微波作用于人体的一个重要靶器官,微波可造成晶状体混浊,视网膜神经元变性、退化、坏死,进而影响视觉功能。以前的研究多集中于晶体的损伤。本文观察了2450MHz微波对体外培养的人视网膜色素上皮细胞的损伤及牛磺酸的防护作用。探讨了微波辐照对细胞凋亡的影响以及牛磺酸对此损伤的防护作用,为进一步研究提供一定的实验依据。实验方法: 1、微波辐照对人视网膜色素上皮细胞生长情况及形态学的影响 体外培养人的视网膜色素上皮细胞系(hTERT-RPE cell line),观察细胞的生长情况及微波对细胞增殖和细胞形态学的影响。按照微波的辐照强度不同分为对照组、10mW/cm~2、20mW/cm~2、30mW/cm~2组,辐照时间为1h,辐照距离为16cm,辐照后,连续7d测定各组细胞数量,制作各组细胞的生长曲线,比较微波对细胞增殖的影响;流式细胞仪测定细胞的周期分布;用光学显微镜和透射电镜观察各组细胞的形态及变化。 2、微波辐照对人视网膜色素上皮细胞脂质过氧化作用观察 对数生长期的细胞,用不同功率密度(0mW/cm~2、10mW/cm~2、20mW/cm~2、30mW/cm~2组)的微波辐照细胞1h,同时测定受辐照各组细胞培养液温度,辐照后收集细胞,测定各组细胞内MDA含量,SOD和GSH-Px活性,DNA双链断裂情况。 3、牛磺酸对微波辐照细胞损伤防护作用观察 防护组细胞培养液中牛磺酸的浓度为5,10,20mmol/L,接受30mW/cm~2微波辐照1h,观察牛磺酸对30mW/cm~2微波的防护作用。 第四军医大毕硕士学位论文实验结果: l、经微波辐照后的细胞,细胞倍增时间延长。观察细胞形态,10mwcf组细胞未见明显变化,20 mw儿 组和 30 mw/cmZ组,细胞部分死亡。 2、辐照后,各组细胞内SOD、GSH-PX活性下降,MDA含量上升;20mw儿 组和 30 mwlemZ组细胞的存活率明显下降;DNA琼脂糖凝胶电泳发现 20 mwicmZ组和 30 mwicmZ组有 DNA ladder出现。 3、牛磺酸可以减轻细胞的损伤且与牛磺酸的浓度有关。结 论: l、2450MHz微波(连续波)辐照抑制了人视网膜色素上皮细胞增殖。10mw/cmZ的微波辐照lh即可引起体外培养的人视网膜色素上皮细胞的损伤,诱发细胞内的脂质过氧化,损伤程度与微波强度有关。 2、2450MHz微波可诱导体外培养的人视网膜色素上皮细胞凋亡。其原因可能与微波诱导的脂质过氧化损伤有关;DNA损伤可能是细胞凋亡的又一原因。 3、牛磺酸可能作为抗氧化剂保护细胞免受微波诱导的脂质过氧化损伤,从而抑制细胞凋亡。