【摘 要】
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该文采用双亲灭活原生质体融合及He-Ne激光诱变技术对红霉素链霉菌(Streptomyces erythreus,简称SE)和龟裂链霉菌(Streptomyces rimosus,简称SR)灭活原生质体种间融合进行
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该文采用双亲灭活原生质体融合及He-Ne激光诱变技术对红霉素链霉菌(Streptomyces erythreus,简称SE)和龟裂链霉菌(Streptomyces rimosus,简称SR)灭活原生质体种间融合进行了研究,结果表明:SE与SR分别在不含与含1%甘氨酸的菌丝体培养基(SM)中培养,对数生长中后期的菌体易于形成原生质体,其在含5%蔗糖的RoM高渗培养基上有较高的再生率,分别为26.80%和37.51%.双亲株原生质体灭活最佳条件为:SE紫外灭活2min,SR热灭活70℃11min.采用40%的聚乙二醇(PEG<,4000>?,在40℃下保温5 分钟有效地诱导了原生质体的融合,种间融合频率最高达1.03×10<-5>.在此条件 下,用波长为632.8nm的He-Ne激光辐照PEG诱导融合的原生质体5分钟,可使融合频率提高到7.86×10<-5>,说明He-Ne激光对链霉菌原生质体不仅具有 诱变作用?而且对其融合有明显的促进作用.另外,通过对融合子酯酶同工酶谱、产抗能力及遗传稳定性进行分析,表明融合子酯酶同工酶谱与亲本相比,其酶带条纹数、迁移率等均发生了显著变化,说明其遗传物质发生了重组.融合子产抗能力与亲本相比最多提高了28.04%,并具有良好的遗传稳定性.
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