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目的研究不同浓度的亚砷酸﹑格列卫单用及联合应用对恶性淋巴瘤细胞株Raji细胞的影响。从而为临床治疗淋巴瘤提供实验依据。方法1. MTT法:检测不同浓度的亚砷酸﹑格列卫单用及联合应用对恶性淋巴瘤细胞株Raji在不同时间的生长抑制作用。取1×10~6/ml的细胞接种于96孔板上,分别于24h,48h,72h用自动酶标仪在490nm处测其吸光度OD值。2.形态学方法:在高倍显微镜下观察经瑞氏-姬姆萨染色,不同浓度亚砷酸﹑格列卫作用于Raji细胞,不同时间(24h,48h,72h)的细胞形态变化。3.采用流式细胞仪检测不同浓度亚砷酸﹑格列卫单用及联合应用对Raji细胞作用后,在不同时间(24h,48h,72h)Caspase-3的表达。4.采用免疫组化SABC法检测不同浓度梯度亚砷酸﹑格列卫单用及联合应用对Raji细胞作用后,在不同时间(24h,48h,72h)P16蛋白的表达。5.采用流式细胞仪检测不同浓度梯度亚砷酸﹑格列卫单用及联合应用对Raji细胞作用后,在不同时间(24h,48h,72h)G1期、S期占整个细胞周期的比例。结果1. MTT法:应用SAS8.0软件析因设计分析结果显示:亚砷酸组、格列卫组及联合组与空白对照组相比差异有显著性(P<0.05﹚;两药联合组与各单药组相比有统计学意义(P<0.05)。2.形态学的观察:亚砷酸诱导Raji细胞于48h出现核膜皱缩,部分胞浆内可见空泡变性,72小时达到凋亡高峰出现凋亡小体。3.流式检测Caspase-3结果显示:亚砷酸诱导Raji细胞Caspase-3表达上调,与空白组相比,不同时相、不同浓度间有统计学意义(P<0.0001),有明显的时间和剂量依赖效应,凋亡高峰时相为72h。格列卫组与及空白对照组相比差异无显著性(P>0.05),两药联合组与单用亚砷酸组相比差异也无显著性(P>0.05),说明两药联用无协同诱导凋亡作用。4.图像分析系统分析免疫组化实验结果显示:Raji细胞随亚砷酸浓度的增加、时间的延长,P16蛋白平均光密度值(optical density)增加,与空白对照组相比有显著差异(P<0.05)。格列卫在低浓度72h与高浓度48h、72h时P16蛋白表达与对照组相比有显著差异(P<0.05)。两药联合组与单用亚砷酸组相比无统计学意义(P>0.05),说明两药联用无协同上调P16蛋白的表达作用。5.流式细胞仪检测细胞周期显示:亚砷酸可使细胞周期阻滞在G1期,使G1期细胞占细胞周期的比例明显增高,S期明显减少,呈现剂量、时间依赖效应(P<0.0001),并出现明显凋亡峰。格列卫对Raji细胞G1期、S期所占比例与对照组相比无显著差异(P>0.05)。而两药联合组与单用亚砷酸组亦无明显差别(P>0.05)。