论文部分内容阅读
氨基甲酸乙酯(Ethyl carbamate,EC)是发酵食品中自然产生的一种物质,具有致癌作用。有研究表明：尿素是黄酒中氨基甲酸乙酯生成的主要前体物。本文首先确定了高效液相色谱法(HPLC)测定黄酒中尿素的检测方法,然后样品采用不同的前处理方法,对三种前处理方法的最佳萃取参数、准确度和精确度进行了比较研究,以氨基甲酸丙酯作为内标物,结合GC/MS对黄酒中EC的含量进行定量分析,选出最佳前处理方法测量黄酒中的氨基甲酸乙酯。最后,比较了热烫处理后黄酒中尿素与氨基甲酸乙酯含量的变化,得出结论如下：(1) HPLC测定黄酒中尿素的方法：选用Alltima Amino Column (4.6x250mm)色谱柱,使用全波长二极管阵列检测器在210nm下进行出峰扫描,以乙腈和水的混合相95：5(V：V)作为流动相,在柱温为38℃℃2时,流速为0.8mL/min进行尿素测定。方法的最低检出限为2mg/L,该方法检测范围在2-100mg/L时,标准曲线相关系数为0.99957；回收率在93.54%-100.6%范围；相对标准偏差2.21%～3.65%。用高效液相色谱法检测黄酒中微量尿素的关键是选好色谱柱,结果表明用氨基柱方法检测准确度好,精密度高。(2)液／液萃取萃取的黄酒中氨基甲酸乙酯的最佳条件参数为：酒样pH值为自然pH值,KC1的浓度为35%,二氯甲烷用量为3×90mL。在此萃取条件下,分析黄酒中氨基甲酸乙酯的含量回收率在74.13%-80.29%之间,同一天内相对标准偏差的检测在4.60%-7.77%之间,相隔三天相对标准偏差的检测在5.65%～8.08%之间。方法的检出限为5.35μg/L。LLE法用于黄酒中EC的萃取时,无需贵重仪器,但乳化现象严重,操作系统误差较大。(3)固相微萃取法萃取黄酒中氨基甲酸乙酯的最佳条件参数为：固相微萃取头选用85μmPA,NaCl溶液的浓度为30%,在pH值为9.0,60℃下萃取30min后,将萃取头在GC/MS的进样口10mmin,进行热解析。在此条件下,检测出黄酒中氨基甲酸乙酯的含量回收率在81.8%～90.4%之间,同一天检测的精密度的相对标准偏差为6.39%-9.57%,相隔三天检测的相对标准偏差为7.64%-10.69%,仪器检出限为1.72μg/L。仪器检出限与萃取头的选择有很大相关性。所以可用固相微萃取检测黄酒中氨基甲酸乙酯的含量,此方法操作简便且不需使用萃取溶剂,是一种绿色的样品前处理方法,但是该方法操作时间长且方法的精密度和准确度均较低。(4)固相萃取法萃取的最佳pH为pH9.0,二氯甲烷的消耗量为3×60mL,在此萃取条件下,分析黄酒EC含量的回收率在94.62%-102.11%间,同一天内相对标准偏差在2.67%～5.98%之间,相隔三天的相对标准偏差为3.07%～6.25%之间,此方法的检出限为1.62μg/L。SPE萃取法准确度高、重现性好。通过以上本研究确定SPE法为检测黄酒中EC含量的最佳前处理方法。(5)实验对6种不同年份的黄酒进行热处理后,研究尿素与氨基甲酸乙酯的含量,结果证明尿素有随黄酒温度升高而减少的趋势,而黄酒中氨基甲酸乙酯会随温度升高而增加。