植物抗菌活性物质及其对果蔬采后病害控制的研究

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果蔬产品农药残留是食品安全中的突出问题之一.为寻找安全、高效和环保型的植物源抗菌物质用于果蔬采后病害的控制,降低化学农药使用量,保障果蔬食品安全性,探索果蔬采后病害防治新途径,该课题在植物材料的选择和收集、果蔬采后病原菌的分离与纯化、植物材料抗菌活性的生物测定、目标植物抗菌活性物质的提取分离纯化、抗菌活性物质的结构鉴定与解析、抗菌活性物质的抗菌毒力测定以及抗菌活性物质对果蔬采后病害的防治等方面作了系统研究,主要研究结果简述如下:多种供试植物具有抗果蔬采后病原真菌的作用.筛选出目标抗菌植物——开口箭.在离体抗菌活性筛选的基础上,用荔枝接种霜疫霉菌对部分植物进行了活体(in vivo)抗病测试,结果显示,百合科植物开口箭具有明显的抗病作用,在质量浓度为800mg·L<-1>时,开口箭甲醇提取物对荔枝霜疫霉菌的接种抗病率高达42.2%,接近于防治荔枝霜疫霉病的专用化学合成药剂——雷多米尔同等浓度(800mg·L<-1>,亦为生产用高限浓度)下的防病效果(50.8%).因而开口箭被选定作为目标抗菌植物.开口箭中的抗菌物质具有一定的极性.采用物理方法和化学试剂法,对开口箭的主要化学成分进行了预备试验,结果表明,抗菌目标植物——开口箭根茎中含有较多的皂甙类和生物碱类物质.用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇对开口箭甲醇提取物进行液-液分部萃取分离,并对各部进行生物活性测试,结果表明,开口箭中的抗菌活性物质分布在氯仿、乙酸乙酯和正丁醇溶剂相,属于中、高极性类物质.在开口箭中分离出9种甾体皂甙类物质.以抗荔枝霜疫霉菌生物测定作为活性导向(activity-guided)跟踪,结合TLC纯化检测技术,运用硅胶柱层析、反相硅胶柱层析和凝胶柱层析等一系列分离纯化方法,从开口箭甲醇提取物的氯仿萃取物和乙酸乙酯萃取物中分离纯化得到7个单体流分.开口箭提(萃)取物具有广谱抗菌性和防治果蔬采后病害的作用.离体生物测定和果实接种病菌后的贮藏试验证明,开口箭甲醇提取物及其乙酸乙酯分部萃取物和正丁醇分部萃取物具有抗荔枝霜疫霉菌、香蕉炭疽病菌和黄瓜疫霉菌等果蔬病原菌的活性.对荔枝霜疫霉病、香蕉炭疽病和黄瓜疫霉病等果蔬采后病害具有明显的防治效果.开口箭中的抗菌物质性质稳定.选用开口箭正丁醇萃取物进行高温(121℃杀菌20min)、紫外光照射(30W紫外灯距50cm直射15hr)和酸处理(调节pH=3),用香蕉炭疽菌进行离体生测证明,开口箭抗菌物质不受热、光、酸等环境因子的影响,具有稳定的抗菌活性.
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