本论文克隆了大菱鲆mIgD基因cDNA全序列，序列特性分析显示其含有免疫球蛋白家族所有的经典结构域。RT-PCR分析该基因在不同组织内的差异表达情况，实时荧光定量PCR检测鳗弧菌刺激后前肾中该基因的时空差异表达情况，推测鱼类mIgD在免疫信号传导及体液免疫防御中均可能起着重要作用。在序列分析的基础上对其进行分段表达，构建mIgD的δ区重组表达载体，并制备了其多克隆抗体。利用其与大菱鲆外周血白细胞间接免疫荧光实验，结果显示两者发生了特异性结合，说明了外周血白细胞的细胞膜上存在膜结合型mIgD。本论文主要包括以下三部分：1大菱鲆免疫球蛋白D重链基因的克隆设计简并引物扩增大菱鲆免疫球蛋白D重链基因的中间保守序列，通过RACE技术获得mIgDcDNA序列，序列全长3357bp，含一个2997bp的开放阅读框，编码999个氨基酸，基因结构为VDJ-μ1-δ1-δ2-δ3-δ4-δ5-δ6-δ7-TM。重链恒定区δ1~δ7氨基酸序列同源比对结果显示其与庸鲽（78%）、鳜鱼（71%）、牙鲆（68%）具有较高的同源性，多序列比对结果显示大菱鲆mIgD的每个δ恒定区内均存在色氨酸与半胱氨酸保守位点。利用邻位相连法构建硬骨鱼类免疫球蛋白系统发育树，结果显示不同鱼类IgD聚为一大支，大菱鲆mIgD与庸鲽及牙鲆聚为一支。2大菱鲆mIgD重链基因的表达分析利用RT-PCR分析了大菱鲆mIgD重链基因的组织差异表达，结果显示其在外周血白细胞、脾脏、前肾及中肾组织中具有较高的表达。将大菱鲆腹腔注射福尔马林灭活鳗弧菌后，实时荧光定量PCR检测了其前肾组织中mIgD重链基因应答表达量，结果显示mIgD重链基因在注射鳗弧菌后呈现显著下调趋势，在注射后8h时降至最低值，其相对表达量约为对照组的1/28左右，然后呈逐渐回复上调趋势，在免疫后48h时免疫组mIgD相对表达量与对照组无显著差异水平。3大菱鲆mIgDδ恒定区基因的重组表达及其多抗的制备构建了mIgDδ恒定区融合表达载体pET32a-δ-mIgD，转入大肠杆菌后成功表达，获得分子量大小为99.5kDa的重组蛋白。另外制备了鼠抗大菱鲆mIgD抗血清，ELISA实验结果显示，pET32a-IgDδ恒定区重组表达蛋白与鼠抗大菱鲆mIgD抗血清具有结合活性。利用该多抗通过间接免疫荧光发现该抗体能与大菱鲆外周血白细胞发生特异性结合，结果说明了外周血白细胞的细胞膜上存在膜结合型IgD。