[目的]通过中药提取物对H.pylori空泡毒素活性的影响作用测定及可能抑制靶标的研究,探讨中医药治疗H.pylori感染性疾病的作用机理,以期阐明中医药治疗H.pylori感染性疾病的可能作用靶标。　　 [方法]①中药提取物最低抑菌浓度(MIC)测定:平皿稀释固体法及脑心浸液液体法测定中药提取物盐酸小檗碱、黄芩苷、氢溴酸槟榔碱、和厚朴酚最低抑菌浓度(MIC)。②药物最终作用浓度的选择:以最低抑菌浓度做为起始浓度倍比稀释,将其作用于BGC-823胃癌细胞,24h后通过台盼蓝染色计数不同浓度梯度下细胞的存活率,以确定药物的最终使用浓度。③药物对H.pylori空泡毒素活性影响作用的观察:将药物作用前后的含空泡毒素上清作用于BGC-823胃癌细胞,采用中性红摄入法评价细胞空泡程度。④H.pylori空泡毒素mRNA水平表达的检测:应用RT-PCR方法通过提取对照组及实验组的细菌RNA,研究药物作用前后H.pylori空泡毒素mRNA水平的表达。⑤H.pylori菌体及分泌上清中空泡毒素表达的检测:应用Western blot方法通过提取对照组及实验组的细菌菌体蛋白及上清蛋白,观察药物作用于H.pylori前后菌体蛋白及上清蛋白中空泡毒素蛋白水平的表达情况。　　 [结果]①在本实验室条件下,测定了四种中药提取物的最低抑菌浓度(MIC),固体法测定结果为:盐酸小檗碱0.38mg/ml、黄芩苷0.33mg/ml、氢溴酸槟榔碱1.25mg/ml、和厚朴酚0.75mg/ml;液体法测定结果为:盐酸小檗碱0.19mg/ml、黄芩苷0.33mg/ml、氢溴酸槟榔碱1.25mg/ml、和厚朴酚0.33mg/ml。②根据药物的MIC和药物的细胞毒测定以及现有文献的报道,确定了药物的最终使用浓度,盐酸小檗碱为0.09mg/ml、黄芩苷为0.08mg/nl、氢溴酸槟榔碱为0.15mg/ml、和厚朴酚为0.09mg/ml。③观察了药物对H.pylori空泡毒素活性的影响作用,并建立了相应的检测方法,结果显示,与对照组相比四种中药提取物中除黄芩苷作用组外,盐酸小檗碱、氢溴酸槟榔碱、和厚朴酚三种中药提取物均不同程度抑制上清中空泡毒素的活性(P＜0.01)。④观察了药物对.H.pylori空泡毒素mRNA水平表达的影响,结果显示,与对照组相比,氢溴酸槟榔碱、和厚朴酚两种中药提取物均不同程度抑制细菌中空泡毒素mRNA水平的表达(P＜0.05)。⑤观察了药物对H.pylori菌体及分泌上清中空泡毒素的影响,结果显示,与对照组相比氢溴酸槟榔碱、和厚朴酚两种中药提取物均不同程度抑制菌体及分泌上清中空泡毒素蛋白的表达(P＜0.05)。　　 [结论]研究表明理气类中药槟榔、厚朴的提取物氢溴酸槟榔碱、和厚朴酚在体外均具有抑制H.pylori空泡毒素活性的作用。