子宫颈是雌性动物维持妊娠和启动分娩的重要器官,宫颈成熟不仅是一个主动的生化过程而且是一个炎症反应,有许多介质都参与了宫颈成熟,如前列腺素、孕酮、松弛素等。前列腺素E(PGE2)在哺乳动物生殖过程中具有广泛多样的生理作用,PGE2的受体分为EP1、EP2、EP3和EP4四种亚型。本课题利用Western blot、免疫组化和荧光定量RT-PCR的方法进行试验,探讨了山羊分娩时子宫颈PGE2的合成来源、受体分布及其PTGS2、PTGER2和PTGER4 mRNA的相对表达量。尽管前列腺素E2(PGE2)被认为是子宫颈成熟过程的重要介质,但PGE2引起子宫颈成熟的机制及在该部位的合成来源仍不清楚,部分原因是缺乏关于子宫颈PGE2合成及其EP受体的精确细胞定位。为了重新了解子宫颈成熟机制,我们利用免疫组化和间接免疫荧光技术对发情周期、妊娠期和分娩期的山羊子宫颈EP2和EP4受体蛋白的表达以及PGE2的合成进行定位,并通过油红O检测证明不同时期的子宫颈是否存在脂肪细胞;同时采用SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR检测了前列腺素E2合成酶(PTGS2)、前列腺素E2受体EP2亚型(PTGER2)、前列腺素E2受体EP4亚型(PTGER4)mRNA在山羊三个不同生理时期(分娩时、妊娠中期、空怀期)的相对表达水平。结果发现分娩期山羊子宫颈EP2和EP4受体广泛分布于子宫颈管粘膜上皮、血管、环形和纵形平滑肌以及基质上;发情期子宫颈中粘膜上皮纤毛和腺管上皮强烈表达EP2受体蛋白,基质中也散在表达EP2和EP4受体。分娩期子宫颈粘膜上皮细胞、肌细胞、血管内皮细胞、基质中各种细胞以及脂肪细胞均可以合成PGE2,而发情前期、后期和间情期以及妊娠期子宫颈两种受体的表达以及PGE2合成均为阴性。山羊分娩时子宫颈组织中PTGS2、PTGER2和PTGER4 mRNA相对表达水平均明显高于妊娠中期、空怀期,且差异极显著(P<0.01),其中妊娠中期相对表达水平最低。分娩期山羊子宫颈中出现脂肪细胞,并能分泌PGE2,且荧光定量结果显示PTGS2、PTGER2和PTGER4 mRNA相对表达量与前列腺素E2合成量及其EP2、EP4受体分布相一致。此外,分娩期子宫颈肌纤维断裂、纤维间出现许多胶胨样物质、血管扩张、间质水肿和白细胞浸润等,这些变化符合分娩期的炎症过程,并有助于平滑肌松弛和子宫颈扩张。PGE2合成细胞和含量的改变以及EP2和EP4舒张性受体分布的变化促进了山羊子宫颈的扩张。