随着社会的发展,生活及工作节奏不断加快,失眠及其导致的相关疾病已严重威胁到人们的公共健康。传统治疗失眠的药物存在诸多的不良反应,已不满足失眠患者的需求。当前,具有改善睡眠功能的中药越来越受到人们的重视,许多中药的镇静催眠活性逐渐被发掘。分心木（Diaphragma juglandis Fructus）是胡桃科胡桃属植物胡桃（Juglans regia L.）果核内的木质隔膜,具有固肾涩精的功效。近年来,人们常采用分心木来治疗失眠并显示了一定的疗效。但关于分心木在镇静催眠方面的相关研究较少,其发挥镇静催眠的活性成分也未见报道。为促进分心木的进一步开发利用,发掘其可能在改善睡眠功能方面的应用价值,本课题对分心木的镇静催眠活性进行考察并对其物质基础进行深入研究。目的:（1）对分心木的镇静催眠活性进行考察;（2）为探究分心木镇静催眠的物质基础,对其化学成分进行深入研究;（3）在化学成分研究的基础上,采用分子对接技术以及基于中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP）的数据挖掘对分离得到的单体化合物进行镇静催眠活性探索,为阐述分心木镇静催眠活性的物质基础以及筛选具镇静催眠活性的单体化合物提供参考。方法:（1）采用小鼠自主活动实验、协同戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠实验等考察分心木提取物对小鼠的镇静催眠活性;采用酶联免疫法检测小鼠大脑中γ-氨基丁酸（GABA）、去甲基肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）等神经递质的含量变化,从分子水平对分心木的镇静催眠活性进行考察。（2）为系统研究分心木的化学成分,在前期已对其中小极性部位考察的基础上,应用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析、ODS柱层析、中压液相色谱以及高效液相色谱等方法对极性较大的正丁醇部位进行化合物的分离纯化,根据其理化性质并运用波谱技术等方法鉴定化合物的结构。（3）为从分心木中筛选高效、不良反应小的镇静催眠活性成分,以新一代抗失眠药物Suvorexant的作用靶点为目标,采用Surflex-Dock分子对接技术考察分心木中的单体化合物与靶标蛋白hOX₂R的相互作用;同时利用TCMSP对分离得到的单体化合物进行检索,挖掘其在镇静催眠方面的相关信息。结果:（1）药理活性研究表明,分心木提取物可缩短阈上剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠的入睡潜伏期,延长小鼠的睡眠持续时间,且具有降低小鼠自主活动的趋势,表明分心木具有一定的镇静催眠活性;进一步研究发现分心木提取物可提高小鼠大脑中GABA含量,降低NE、DA水平,与阳性药物地西泮的作用趋势一致,提示分心木具有调节脑内相关神经递质含量变化的作用,从分子水平验证了分心木的镇静催眠活性。（2）在对前期分得的2个异构体结构完整鉴定的基础上,采用多种分离手段从分心木提取物的正丁醇部位又得到了18个单体化合物,通过理化性质、波谱技术等方法鉴定上述化合物的结构分别为:（2S,3S）-taxifolin-3-O-α-D-arabinofuranoside（1）,（2S,3S）-taxifolin-3-O-α-L-arabinofuranoside（2）,Leeaoside（3）,二氢吐叶醇-9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（dihydrovomifoliol-9-O-β-D-glucopyranoside）（4）,吐叶醇-9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（vomifoliol-9-O-β-D-glucopyranoside）（5）,4′-dihydrophaseic acidβ-glucopyranose ester（6）,lyoniside（7）,nudiposide（8）,（-）-5′-甲氧基异落叶松脂素-9′-O-β-D-吡喃木糖苷（（-）-5′-methoxyisolariciresinol-9′-O-β-D-xylopyranoside）（9）,（+）-lyoniresinol-3α-O-β-D-glucopyranoside（10）,akeqintoside A（11）,山柰酚（kaempferol）（12）,儿茶素（catechin）（13）,柚皮素（naringenin）（14）,山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷（kaempferol-3-O-α-L-rhamnoside）（15）,4-羟基-α-萘酮-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4-hydroxy-α-tetralone-4-O-β-D-glucopyranoside）（16）,4,5-二羟基-α-萘酮-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4,5-dihydroxy-α-tetralone-4-O-β-D-glucopyranoside）（17）,4,5,8-三羟基-α-萘酮-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4,5,8-trihydroxy-α-tetralone-5-O-β-D-glucopyranoside）（18）,leonuriside A（19）和胡萝卜苷（daucosterol）（20）。（3）分子对接结果显示分心木中的部分黄酮苷、木酯苷及脱落酸衍生物与靶标蛋白hOX₂R的对接得分较高,提示该系列化合物可能具有食欲素受体拮抗剂作用;TCMSP数据挖掘结果表明脱落酸类衍生物的潜在作用靶标包含多个与镇静催眠活性相关的GABA受体的亚型（如α1、α2、α3、α6）。结论:本课题通过行为药理学实验发现分心木提取物具有一定的镇静催眠活性;酶联免疫法检测结果表明分心木具有调节脑内相关神经递质的作用,进一步从分子水平验证了分心木的镇静催眠活性。在药理学考察的基础上,对分心木的化学成分进行了深入研究,分离鉴定了20个单体化合物,其中化合物1为新化合物,化合物2-12,15-19为分心木中首次分离得到,丰富了其物质基础。采用分子对接技术以及基于TCMSP的数据挖掘,对分离的单体化合物进行了镇静催眠活性探索,发现分心木中的部分黄酮苷、木酯苷及脱落酸衍生物可能为其镇静催眠的活性成分;数据挖掘显示,其中的脱落酸类化合物又与GABA受体密切相关,在治疗失眠、睡眠障碍等疾病方面显示出良好潜力。以上研究为分心木可用于治疗失眠疾病提供了理论支持,同时为阐述其药效物质基础以及筛选具有镇静催眠活性的单体化合物提供了参考。