夹脊电针对大鼠横断脊髓损伤区Cdc42蛋白表达的影响

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:olddai1
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目的:通过采用夹脊电针干预全横断脊髓损伤大鼠模型,探索横断区域Cdc42蛋白表达及变化规律,观察损伤区域组织形态学变化以及治疗前后大鼠后肢运动功能的恢复情况,进而探讨夹脊电针对脊髓损伤大鼠的神经修复及保护作用机理,为临床治疗提供可靠的实验依据。方法:将81只SD成年雌性大鼠按照随机数字表法进行分组,分为假手术组(空白对照组)、模型组以及夹脊电针组,各27只。制备全横断脊髓损伤大鼠模型,假手术组切开大鼠背部皮肤,分离筋膜、肌肉,咬除椎板,仅暴露T10节段脊髓,不予横断处理,直接逐层缝合伤口;模型组与夹脊电针组均全横断大鼠T10节段脊髓,再逐层缝合伤口。三组造模成功后均予以术后常规护理。在造模成功2h后,夹脊电针组开始介入夹脊电针治疗,30min/次,1次/日;其余两组不进行任何治疗,仅抓取、捆绑,30min/次,1次/日。各组大鼠分别在造模前与造模后3d、7d、14d四个时间点进行BBB评分,以量化评估大鼠双下肢运动功能变化情况,随后提取大鼠损伤区的脊髓组织,采用Western Blot法检测各组大鼠的Cdc42蛋白表达情况,NSE免疫组化染色法观察脊髓组织中神经元与轴突的变化情况。结果:1.BBB评分:与假手术组术后3d、7d、14d三个时间点的BBB评分相比,模型组和夹脊电针组大鼠的评分均明显下降(P<0.05);与模型组术后三个时间点的BBB评分相比,夹脊电针组大鼠的评分明显升高(P<0.05);组内比较,与夹脊电针组治疗3d、7d后的BBB评分相比,治疗14d的评分显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2.Western Blot法检测结果:与假手术组术后3d、7d、14d三个时间点相比,模型组和夹脊电针组大鼠脊髓损伤区Cdc42蛋白表达水平均升高(P<0.05);与模型组术后三个时间点相比,夹脊电针组大鼠脊髓损伤区Cdc42蛋白表达明显上调(P<0.05);组内比较,与夹脊电针组治疗3d、7d相比,治疗14d时损伤区域Cdc42蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。3.NSE免疫组化染色结果:假手术组染色阳性神经元较多,胞体呈圆形或锥体形,且表面轴突形态完整,黄染均匀、清晰。与假手组术后3d、7d、14d三个时间点相比,模型组脊髓损伤区域阳染细胞的数量减少,AOD值降低明显(P<0.05),出现着色不均,脱染等现象;与模型组术后3d、7d、14d三个时间点相比,夹脊电针组脊髓损伤区域阳染细胞的数量增加,其AOD值明显升高(P<0.05);组内比较,与夹脊电针组治疗3d、7d相比,治疗14d时阳染细胞的数量及AOD值升高明显(P<0.05),可见部分神经元及轴突的形态趋近正常,脱染现象减少。结论:1.夹脊电针能够提高脊髓损伤大鼠后肢运动功能,上调横断损伤区Cdc42蛋白表达,促进受损轴突的再生。2.夹脊电针能够减少脊髓损伤区神经元的死亡数量,修复受损神经。
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