扶正祛毒方干预慢性乙肝病毒携带小鼠免疫耐受机制研究

来源 :北京中医药大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:RockyZhang111
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目的:慢性乙肝病毒携带者是乙肝病毒感染后的一类特殊患病人群,转氨酶在正常范围,且一般见不到肝组织学异常改变,但是具有HBeAg和HBsAg阳性、HBV DNA高复制的特点,常在隐匿状态下进展为肝癌或肝硬化。目前研究认为免疫耐受是乙肝病毒慢性携带的核心机制,鉴于慢性乙肝病毒携带者免疫耐受与“正虚毒伏”学说的共通性,本实验提出以具有扶正祛毒功效的扶正祛毒方对慢性乙肝病毒携带小鼠进行早期持续干预,以相关细胞因子为切入点,观察慢性乙肝携带小鼠HBsAg、HBeAg、肝组织病理及转氨酶的变化,探讨扶正祛毒方调节慢性乙肝病毒携带小鼠免疫功能的作用机制。方法:将8-12周龄的雄性HBV转基因小鼠30只随机等分为模型组、西药组、中药组,空白组为其同系同周龄的雄性小鼠。4组均正常饲养,中药组从实验开始第1周起,予扶正祛毒方灌胃,西药组予对照药物灌胃。24周后处死取血清及肝组织,生化法检测小鼠血清中ALT、AST,化学发光免疫分析法测HBsAg、HBeAg,ELISA检测肝组织中IFN-γ、TNF-α、IL-10表达,HE染色观察肝组织病理学改变。结果:1 一般情况:模型组小鼠及西药组小鼠皮毛色泽暗淡,喜静少动,进食量略有减少。中药组小鼠和空白组小鼠皮毛光泽度好,活泼好动,进食量正常。2小鼠血清转氨酶:模型组小鼠ALT、AST显著高于空白组(P<0.05)。中药组、西药组AST、ALT显著低于模型组(P<0.05)。3小 小鼠血清 HBsAg、HBeAg:HBsAg:空白组、模型组、西药组、中药组HBsAgp阳性率分别为0%、100%、100%、100%(阴性<0.05,阳性≥0.05)。HBeAg:空白组、模型组、西药组、中药组HBeAg阳性率分别为(0%、100%、71.4%、57.1%,中药组HBeAg阴转率为42.9%,西药组HHBeAg阴转率为28.6%(阴性<1,阳性≥1)。4小鼠肝组织中细胞因子的表达情况:1FN-γ:模型组、西药组、中药组显著低于空白组(P<0.05);中药组显著高于模型组(P<0.05)。TNF-α:模型组、西药组、中药组显著高于空白组(P<0.05)。IL-10:模型组、西药组、中药组显著高于空白组(P<0.05),中药组显著低于模型组和西药组(P<0.05)。5肝组织病理学表现:与空白组相比,模型组小鼠肝小叶结构紊乱,肝组织内可见纤维组织组织增生伴炎性细胞浸润。西药组与空白组和模型组相比较,仅在胆管周围可见轻度纤维组织增生。中药组肝脏标本与空白组类似,并未出现上述病理改变。结论:1扶正祛毒方可以减轻慢性乙肝病毒携带小鼠肝脏炎性损伤,延缓肝纤维化形成。2扶正祛毒方能够抑制慢性乙肝病毒携带小鼠血清HBeAg的表达,对HBV的复制具有抑制作用。3扶正祛毒方能够在上调IFN-γ表达的同时下调IL-10表达,从而活化细胞免疫状态,有利于机体清除HBV。4具有扶正祛毒作用的扶正祛毒方能够改善慢性乙肝病毒携带小鼠的预后。其可能作用机制是通过调节细胞因子表达活化细胞免疫,实现抑制病毒复制,从而延缓了肝纤维化进程。
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