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第一部分海马CA1区TSPO过表达对小鼠认知损害的保护作用及机制目的对神经损伤保护作用的研究是当今的科研热点之一。转位蛋白18kDa(TSPO)在中枢神经系统内主要由胶质细胞表达,其位于线粒体外膜,参与将胆固醇由线柱体膜外转运至膜内。TSPO在神经损伤状态下表达会显著增加,但TSPO的此种调节在神经损伤过程中所起的作用尚不明确。本实验使用脂多糖(LPS)外周给药导致小鼠认知功能障碍的模型,通过慢病毒转染使小鼠海马CA1区TSPO过表达，以验证其是否可改善认知功能障碍,并且探讨这种保护作用与神经甾体的关系。方法根据微注射慢病毒类型、是否腹腔注射LPS及是否腹腔注射非那雄胺(FN),将C57BL/6J小鼠按体重随机分成8组(12只/组)：NC组、TSPOoe组、NC+LPS组、TSPOoe+LPS组、NC+LPS+FN组、TSPOoe+LPS+FN组、NC+FN组及TSPOoe+FN组。第0天使用脑立体定向装置将阴性对照病毒(NC)或TSPO过表达慢病毒(TSPOoe)注入实验小鼠双侧海马CA1区。从第15天开始直至行为实验结束(第26天)向相应组别的小鼠腹腔内注射非那雄胺(5mg/kg)或对照溶剂,30min后再注射LPS(250μg/kg)或对照溶剂,每天一次。第22天起在LPS注射后30min进行Morris水迷宫实验。最后收集实验小鼠海马穿刺区的组织,使用Western-blotting法测定TSPO表达量，使用ELISA试剂盒测定神经甾体含量。结果 (1)在Morris水迷宫隐藏平台获得实验里,重复测量多因素方差分析提示时间和LPS对小鼠平台定位潜伏期的影响具有统计学意义(Ftime=157.42,P=0.0001; FLPS=10.53,P=0.0017).在第2天的训练中NC+LPS组小鼠找到平台的过程较NC组明显延长。而在第4天,NC组与其余7组相比均无统计学差异,结果提示通过4天的学习,各组小鼠均可成功地找到隐匿的平台。(2)Morris水迷宫空间探索实验结果显示.NC+LPS组的小鼠在目标象限停留时间比例较NC组明显缩短;TSPOoe+LPS组的小鼠则较NC+LPS组明显延长;而相较于TSPOoe+LPS组,TSPOoe+LPS+FN组小鼠的目标象限停留时间比例明显减少。(3)Western-blotting结果经三因素方差分析显示,微注射TSPOoe的小鼠海马CA1区的TSPO表达量显著提高。而经LPS处理的小鼠海马CA1区的TSPO的表达量亦明显提高。(4)微注射TSPOoe小鼠的海马CA1区孕酮及四氢孕酮含量均显著增加。非那雄胺对小鼠海马CA1区的孕酮合成无显著影响,但可显著降低小鼠海马CA1区四氢孕酮水平。结论TSPO在海马CA1区的过表达可改善LPS导致的小鼠学习和记忆功能障碍。并增加小鼠海马CA1区孕酮和四氢孕酮的含量,使用非那雄胺阻断四氢孕酮的合成可部分反转由TSPO过表达产生的脑保护效应。实验同时也提示,在神经损伤中TSPO水平的上调可能是机体自身的适应性保护作用,这可能与机体需要更多的内源性神经甾体尤其是四氢孕酮有关。因此，我们认为TSPO具有明确的脑损伤保护作用,可作为今后的临床工作中一种有效的治疗靶点。第二部分BV-2细胞的TSPO过表达对小鼠海马原代神经元损伤的保护作用及机制目的 通过体外实验来探讨BV-2细胞TSPO过表达对神经元的影响及作用机制。方法 根据转染BV-2细胞的慢病毒类型(NC或TSPOoe)以及是否给予LPS(100ng/ml)刺激,将BV-2细胞分为四组：NC组、TSPOoe组、NC+LPS组及TSPOoe+LPS组,使用ELISA试剂盒测量BV-2细胞培养基中TNF-α及IL-6的含量。收集BV-2细胞的条件培养基(CM)作用于小鼠海马原代神经元。并根据BV-2细胞不同处理条件下产生的CM,将原代神经元分成4组：NC-CM组、TSPOoe-CM组、NC+LPS-CM组及TSPOoe+LPS-CM组。使用CCK-8法检测各组神经元的活力。结果 (1)NC+LPS组细胞培养基中的TNF-α及IL-6含量较NC组均显著增加,而TSPOoe+LPS组培养基中的TNF-α及IL-6含量较NC+LPS组均显著降低。(2)CCK-8结果显示：NC+LPS-CM组中小鼠海马原代神经元的活力明显低于NC-CM组;而TSPOoe+LPS-CM组的原代神经元活力较NC+LPS-CM组明显增加。结论TSPO的过表达可减弱LPS诱导BV-2细胞合成TNF-α和IL-6的能力,具有明显的抑制炎症作用。同时,LPS刺激BV-2细胞产生的上清液对神经元具有损害作用,而将BV-2细胞预转染TSPOoe病毒则减轻了这种的损害作用。