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利用平皿生化分离法,从大自然中筛选产红色色素菌株,通过经典鉴定,确定菌株为酵母菌。利用研磨法提取酵母色素,进行紫外(UV)全波长扫描法和高效液相色谱(HPLC)法鉴定,其主要成分为类胡萝卜素,采用单因素和响应面实验优化了菌株产类胡萝卜素的最佳发酵工艺参数,研究了酵母菌源性类胡萝卜素的稳定性、最佳保存条件和使用环境,以期获得产类胡萝卜素酵母菌株的最佳发酵工艺,为微生物源性类胡萝卜素的生产提供理论和技术支撑,进而为工业化生产微生物源性类胡萝卜素奠定基础。结论如下:
(1)酵母菌株色素的主要成分为β-胡萝卜素。测定红酵母FS-1的生长曲线及色素累积曲线,发现红酵母色素为酵母菌生长的次级代谢产物,选定96h为最佳发酵周期。
(2)采用Box-Behnken实验设计,最终得到红酵母FS-1发酵生产类胡萝卜素的最优工艺为:豆芽汁培养基为基础培养基,添加葡萄糖24.84g/L,蔗糖31.19g/L,蛋白胨8.98g/L,0.1%豆油,pH4.87,装液量28%,接种量8%;得到红酵母FS-1的生物量为(16.15±0.29)g/L,色素含量(783.57±4.11)μg/g,色素产量(12.65±0.17)mg/L。优化后该菌色素含量比其他野生菌株高了2-9倍。
(3)红酵母色素在中性偏酸性的条件下较稳定,在碱性条件下稳定性较差;热稳定性差,50℃以上保存率迅速降低;对光敏感,特别是在日光直射条件下很不稳定;氧化剂对其破坏较大,还原剂对红酵母色素稳定性影响较小;金属离子Zn2+、Fe2+、K+对酵母色素无不良影响,但其对Ca2+、Mg2+、Cu2+、Fe3+等耐受性较差;对蔗糖、葡萄糖、酒石酸、柠檬酸、苹果酸等食品添加剂有较好稳定性,保存率均可达80%以上。