【摘 要】
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目的:研究代谢干扰物全氟辛烷磺酸（PFOS）对大鼠胰岛细胞瘤细胞凋亡以及分泌功能的影响。方法:体外培养大鼠胰岛细胞瘤细胞INS-1,实验中用不同终浓度的PFOS溶液分别为10、50、100、200、300、400μmol/L（处理组）和0.1%DMSO（对照组）来干预细胞,在24、48、72h后用细胞毒性CCK8检测试剂盒对INS-1细胞进行细胞增殖检测;采用细胞荧光染色技术观察100、200、3
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目的:研究代谢干扰物全氟辛烷磺酸（PFOS）对大鼠胰岛细胞瘤细胞凋亡以及分泌功能的影响。方法:体外培养大鼠胰岛细胞瘤细胞INS-1,实验中用不同终浓度的PFOS溶液分别为10、50、100、200、300、400μmol/L（处理组）和0.1%DMSO（对照组）来干预细胞,在24、48、72h后用细胞毒性CCK8检测试剂盒对INS-1细胞进行细胞增殖检测;采用细胞荧光染色技术观察100、200、300μmol/L的PFOS溶液干预细胞24h后对细胞形态的影响;用流式细胞仪检测10、50、100、200、300μmol/L的PFOS溶液干预细胞24h后细胞的凋亡状态;用实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）检测10、50、100、200μmol/L的PFOS溶液干预细胞24h后细胞的凋亡促进基因Bax、凋亡抑制基因Bcl-2、胰岛素基因1和2、葡萄糖转运蛋白基因Glut2的m RNA的表达情况;并采用蛋白质印迹法检测100、200μmol/L的PFOS溶液干预细胞24h后凋亡促进基因Bax、凋亡抑制基因Bcl-2和髓样分化因子My D88的蛋白表达水平;用胰岛素Elisa试剂盒检测50、100、200μmol/L的PFOS溶液干预细胞24h后,用低糖2.8mmol/L和高糖25mmol/L分别刺激下的胰岛素分泌。结果:（1）PFOS干预细胞24、48、72h后,细胞增殖趋势在这三个时间段大体相同,与对照组相比,10、50μmol/L处理组细胞增殖没有明显变化,100、200、300、400μmol/L PFOS处理组细胞增殖能力明显减弱（p<0.01）,并呈浓度依赖性降低。（2）PFOS干预细胞24h之后,与对照组相比,10、50μmol/L处理组细胞凋亡没有明显变化,在100μmol/L处理组晚期凋亡细胞明显增多（p<0.01）,但是早期凋亡细胞量没有明显变化,200、300μmol/L处理组晚期凋亡和早期凋亡细胞都显著增多（p<0.001）。（3）PFOS干预细胞24h之后,与对照组相比,处理组细胞形态发生改变,数量减少,体积缩小,形态皱缩,细胞发生破裂。（4）与对照组相比,10、50μmol/L处理组凋亡促进基因Bax的基因表达略微减少,无明显变化,100、200μmol/L处理组Bax的基因和蛋白表达明显增多（p<0.05）,所有处理组细胞凋亡抑制基因Bcl-2的基因和蛋白表达都明显减少（p<0.01）,胰岛素1和2基因呈浓度依赖性显著减少（p<0.01）,葡萄糖转运蛋白Glut2基因表达明显降低（p<0.01）,髓样分化因子My D88的蛋白表达呈浓度依赖性显著升高（p<0.01）。（5）与对照组相比,在低糖和高糖状态下,PFOS均对胰岛素分泌具有抑制作用。结论:PFOS可通过增加凋亡促进基因Bax和降低凋亡抑制基因Bcl-2的表达,并增加髓样分化因子My D88蛋白表达,促进炎症因子释放,使INS-1细胞凋亡;还可能通过降低胰岛素和葡萄糖转运蛋白Glut2的表达,使血糖浓度升高;PFOS会使INS-1细胞的GSIS功能受损,减少胰岛素分泌。
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