成牙本质细胞(Odontoblast)是牙髓组织中最重要的细胞，它与牙本质的形成和维持有着极密切的关系，在牙齿发育和牙髓修复等方面处于举足轻重的地位。随着生物医学的飞速发展，对成牙本质细胞的研究已从单纯的组织形态的现象观察迈进分子机理和基因调控的本质研究。但由于成牙本质细胞位于牙齿硬组织内，组织量少，活体取材困难，加之属于终末分化的永久性细胞，故目前尚未见到有关成牙本质细胞单独体外培养成功的报道。本研究针对上述问题，采用现代细胞培养技术，在体外建立人成牙本质细胞的前体细胞——牙乳头细胞和牙髓细胞的有限细胞系，结合处于成牙本质细胞分化关键时期的大鼠牙胚，从细胞和分子水平探讨了激素和生长因子与牙髓细胞、牙乳头细胞、牙胚的分化和矿化的影响，实验分为三个部分：1、体外人牙髓细胞、人牙乳头细胞、大鼠牙胚实验模型的建立；2、体外人牙乳头细胞的矿化特征；3、生长因子与人、大鼠牙胚、人牙髓细胞分化关系的研究。 一、体外人牙髓细胞、人牙乳头细胞、大鼠牙胚实验模型的建立 以牛肌腱胶原凝胶体作为滋养层，采用组织块法对人牙髓、牙周和牙龈细胞进行体外培养。结果发现：牛肌腱胶原滋养层提高了人牙髓、牙周和牙龈组织块的贴附率和细胞的生存率，其中人牙髓、牙周组织在铺有牛肌腱胶原的培养瓶中进行原代培养，其成功率分别为42.9％和33.3％，与对照组相比有显著的统计学差异(P＜0.01，P＜0.05)。所培养的上述三种细胞能适应体外培养环境，生长稳定，形态上以梭形或矛状为主，可以作为牙髓、牙周和牙龈组织研究的细胞模型。 为了建立体外培养人牙乳头细胞的方法，同时比较酶消化法和组织块贴壁法对培养结果的影响，本组选用合法堕胎的8月龄男胎的乳牙牙乳头组织，按A、C区和B、D区将组织分成两组，一组用酶消化法获取细胞，即0.2％胰酶和0.02％ EDTA在37℃条件下消化20min；另一组采用常规组织块贴壁法。结果显示：在酶消化法组中原代细胞按形态分为梭形、星形纤维细胞样和内皮样三种。内皮细胞在贴壁培养组和继代的酶消