探讨人未成熟卵母细胞体外培养成熟的价值

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qingmiannv
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目的:研究来源于常规超排卵周期体外受精-胚胎移植或卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI-ET)的未成熟卵母细胞,观察其在商品化IVM培养液中以及人输卵管液(HTF)中体外培养成熟、受精、胚胎发育及囊胚形成能力,探讨人未成熟卵母细胞在体外成熟后的应用价值。方法:选择在我中心行常规超排卵周期IVF/ICSI-ET助孕的58例患者,将周期中获得的未成熟卵母细胞按照不同培养液培养(IVM培养液和HTF培养液),不同开始培养时间(取卵后4h.10h.24h),不同生长阶段(GV期和MI期),不同成熟来源(体内和体外)等分组。将未成熟卵母细胞进行体外成熟培养,成熟卵子行ICSI授精后进行胚胎培养,第三天选择1,2级胚胎进行囊胚培养。比较分析上述分组的卵母细胞成熟率,受精率,卵裂率和1,2级胚胎率等情况。结果:1.两组培养液中,IVM组成熟率,受精率,卵裂率,1,2级胚胎率均高于HTF组,受精率差异有统计学意义(68.57%和36.73%,P<0.05)。2.两组培养液中开始培养的时间D24h组与D4h组相比,成熟率,受精率,卵裂率均差于D4h组,受精率(P<0.05)均有统计学意义。两种液体中D10h与D4h相比,成熟率,受精率,卵裂率虽较D4h组差,统计学是无差异的。3.IVM培养液中,MI期卵母细胞的成熟率,受精率,卵裂率均高于GV期卵母细胞,成熟率(80.36%和55.55%,P<0.01)和卵裂率(71.11%和64%,P<0.05)差异有统计学意义。在HTF培养液中,MI期卵母细胞的成熟率,受精率,卵裂率均高于GV期,其中成熟率(68.89%和43.9%,P<0.01)和受精率(41.93%和27.77%,P<0.05)差异有统计学意义。4.体外的IVM组和HTF组与同源体内组相比,卵裂率(77.08%,72.22%,92.71. P<0.05),1,2级胚胎率(59.45%,30.76%,79.84%.P<0.05)均低于同源体内组,统计学差异具有显著性。HTF组与同源体内组相比受精率(36.73%和65.92%,P<0.05)差异有统计学意义。5.187个未成熟卵母细胞经体外培养成熟后得到的26个1,2级胚胎进行囊胚培养共形成5个囊胚。结论:1.控制性超排卵周期中获得的未成熟卵母细胞能够在体外发育成熟并形成正常受精的胚胎。2.未成熟卵母细胞在IVM培养液比在HTF培养液中培养更有利于卵母细胞的发育。3.IVM开始培养的时间可以选在取卵后10h内进行。4.正常超排卵周期获得的MI期的卵母细胞体外培养比GV期的卵母细胞体外培养更容易成熟且得到质量较好的胚胎。5.未成熟卵母细胞经体外培养成熟后仍有形成囊胚的潜能。
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