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随着糖尿病患病率的增加，出现糖尿病并发症的患者逐年增多。对于糖尿病并发症，人们关注最多的是血管及神经系统病变，而对于糖尿病合并肝脏病变的研究较少，有研究发现糖尿病患者中合并肝脏病变者高达50%以上。肝脏既是胰岛素作用的靶器官，又是胰岛素抵抗发生的重要靶器官，因此，肝脏胰岛素抵抗机制的研究对于加强糖尿病肝病的相关研究、改善糖尿病病情及病情进展、改善糖尿病患者的生活质量具有重要意义。丝胶是分子量为10-300kd，由18种氨基酸组成的高分子水溶性蛋白。丝胶的含量约占蚕丝总量的30%，但在缫丝和精炼时极大部分被除去，造成了极大的浪费，这些优质蛋白的有效利用一直是蚕丝界所希望的。近年的研究发现，丝胶具有良好的降血糖作用，但有关丝胶对糖尿病肝脏胰岛素抵抗的保护作用，国内、外均未见报道。本研究以链脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)致2型糖尿病大鼠模型为研究对象，探讨丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用，为治疗和防治糖尿病并发症开辟新途径。第一部分丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素信号通路相关因子的作用目的：观察丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素受体(Insulin Receptor，IR)和胰岛素受体底物-2(Insulin Receptor Substrate-2，IRS-2)表达及肝糖原含量的影响，探讨丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素信号通路的作用及可能机制。方法：1.60只清洁级雄性SD大鼠随机分为5组：正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组、阳性对照组和丝胶预防组，每组12只。正常对照组大鼠不做任何处理；糖尿病模型组、丝胶治疗组、阳性对照组和丝胶预防组大鼠以2%STZ(25mg/kg，3d)连续腹腔注射制作2型糖尿病大鼠模型，一周后以血糖(Blood Glucose，BG)≥16.7mmol/L作为成模标准。待模型成功建立后，糖尿病模型组大鼠不做任何处理；丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4g/kg/d)连续灌胃35天；阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.33mg/kg/d)连续灌胃，时间同丝胶治疗组。丝胶预防组大鼠于2%STZ(25mg/kg)连续腹腔注射之前给予丝胶(2.4g/kg/d)灌胃35天。2.釆用葡萄糖氧化酶法检测各组大鼠的BG。3.分别采用SP免疫组化法、Western Blotting法检测各组大鼠肝脏IR和IRS-2蛋白的表达。4.釆用RT-PCR法检测各组大鼠肝脏IR、IRS-2mRNA的表达。5.釆用过碘酸-Schiff染色法观察各组大鼠肝糖原的含量。结果：1.各组大鼠的BG：正常对照组大鼠的BG为(10.83±2.03)mmol/L，糖尿病模型组大鼠的BG为(29.45±4.82)mmol/L，明显高正常对照组大鼠的BG水平(P＜0.01)；丝胶治疗组、阳性对照组、丝胶预防组大鼠的BG分别为（13.20±4.09）mmol/L、（13.18±2.30）mmol/L、（10.04±2.29）mmol/L，均明显低于糖尿病模型组大鼠的BG水平（P＜0.01）；且丝胶治疗组、丝胶预防组与阳性对照组比较无明显差异（P＞0.05）。2.各组大鼠肝脏IR的表达：IR蛋白免疫阳性产物为棕黄色和(或)棕褐色颗粒，主要位于肝细胞的胞膜和胞浆。与正常对照组比较，糖尿病模型组大鼠肝脏IR蛋白及mRNA的表达明显降低（P＜0.01）；丝胶治疗组、丝胶预防组与阳性对照组大鼠肝脏IR蛋白及mRNA的表达较糖尿病模型组大鼠明显升高（P＜0.01），且丝胶治疗组和阳性对照组比较无明显差异（P＞0.05）。3.各组大鼠肝脏IRS-2的表达：IRS-2蛋白免疫阳性产物为棕黄色和(或)棕褐色颗粒，主要位于肝细胞的胞膜和胞浆。正常对照组比较，糖尿病模型组大鼠肝脏IRS-2蛋白及mRNA的表达明显降低（P＜0.01）；丝胶治疗组、丝胶预防组与阳性对照组大鼠肝脏IRS-2蛋白及mRNA的表达较糖尿病模型组大鼠明显升高（P＜0.01），且丝胶治疗组和阳性对照组比较无明显差异（P＞0.05）。4.各组大鼠肝糖原的含量：肝糖原阳性结果表现为紫红色颗粒或细腻颗粒片状聚集，主要位于肝细胞胞浆。糖尿病模型组大鼠肝糖原含量明显低于正常对照组大鼠(P＜0.01)；丝胶治疗组、丝胶预防组和阳性对照组大鼠的肝糖原含量均明显高于糖尿病模型组大鼠(P＜0.01)；且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差别(P>0.05)。小结：丝胶可通过上调糖尿病肝脏IR和IRS-2的表达，改善糖尿病大鼠的胰岛素抵抗，增加肝糖原的储存，起到降低血糖预防并发症的作用。第二部分丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏相关炎症因子的作用目的：探讨丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏肿瘤坏死因子-α(Tumor NecrosisFactor-α，TNF-α)和肝细胞核因子-4α(Hepatocyte Nuclear Factor4α，HNF-4α)作用及机制。方法：1.60只清洁级雄性SD大鼠随机分为5组：正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组、阳性对照组和丝胶预防组，每组12只。正常对照组大鼠不做任何处理；糖尿病模型组、丝胶治疗组、阳性对照组和丝胶预防组大鼠以2%STZ(25mg/kg，3d)连续腹腔注射制作2型糖尿病大鼠模型，一周后以血糖(Blood glucose，BG)≥16.7mmol/L作为成模标准。待模型成功建立后，糖尿病模型组大鼠不做任何处理；丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4g/kg/d)连续灌胃35天；阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.33mg/kg/d)连续灌胃，时间同丝胶治疗组。丝胶预防组大鼠于2%STZ(25mg/kg)连续腹腔注射之前给予丝胶(2.4g/kg/d)灌胃35天。2.分别采用SP免疫组化法、Western Blotting法检测各组大鼠肝脏TNF-α和HNF-4α蛋白的表达。3.采用RT-PCR法检测各组大鼠肝脏TNF-α和HNF-4α mRNA的表达。结果：1.各组大鼠肝脏TNF-α的表达：TNF-α蛋白免疫阳性产物为棕黄色颗粒，主要位于肝细胞胞浆。与正常对照组比较，糖尿病模型组大鼠肝脏TNF-α蛋白及mRNA的表达均明显升高（P＜0.01）；丝胶治疗组、阳性对照组与丝胶预防组大鼠肝脏TNF-α蛋白及mRNA的表达较糖尿病模型组大鼠明显降低（P＜0.01）；且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差异（P＞0.05）。2.各组大鼠肝脏HNF-4α的表达：HNF-4α蛋白免疫阳性产物为棕黄色颗粒状，主要位于肝细胞胞核。糖尿病模型组大鼠肝脏HNF-4α蛋白及mRNA的表达明显高于正常对照组大鼠（P＜0.01）；丝胶治疗组、阳性对照组和丝胶预防组大鼠肝脏HNF-4α蛋白及mRNA的表达明显低于糖尿病模型组大鼠（P＜0.01）；且丝胶预防组与正常对照组比较无明显差异（P＞0.05）。小结：丝胶可通过下调肝脏TNF-α和HNF-4α表达，改善糖尿病因亚临床炎症引起的胰岛素抵抗。