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目的：放射治疗为肺癌治疗的重要手段,但是肿瘤细胞对射线的抗拒性将降低放射治疗效果。本研究利用RNAi技术抑制Bcl-2基因的表达联合照射观察其对非小细胞肺癌NCI-H460细胞周期、细胞活性的影响。
材料与方法利用以Pcyu6/GFP/Neo为载体的Bcl-2/shRNA重组质粒转染人大细胞肺癌NCI-H460细胞。采用Western blot方法检测Bcl-2基因蛋白水平表达的变化。继而给与直线加速器6Gy X线照射。采用MTT法和流式细胞术检测RNA干扰及照射后对NCI-H460细胞的增殖情况和细胞周期的影响。
结果：成功转染NCI-H460细胞,检测示Bcl-2蛋白表达水平显著降低;6GyX线照射后转染组细胞增殖情况较未转染组明显降低;流式细胞术显示照射后转染细胞组G2/M期分布比例较其它组明显增高。
结论： RNAi技术可以有效的抑制人大细胞肺癌NCI-H460细胞内Bcl-2基因的表达,联合照射后NCI-H460细胞增殖率及细胞周期发生改变。