基于角蛋白序列差异的角类中药材专属性鉴别方法的研究

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角类药材是我国特有的一类动物来源的中药,且多为名贵中药。具有活性强、疗效显著、副作用小等特点,应用也日益广泛。目前,由于资源紧缺,导致市场上角类药材假冒伪劣现象较为严重,质量参差不齐,市场秩序非常混乱。特别是针对羚羊角等已失去了外观性状的饮片的掺伪、造假现象更为严重。且由于角类药材中化学成分为角蛋白,目前,尚无针对角蛋白的专属性鉴别方法。鉴于上述情况,建立专属性强的角类药材的质量控制方法,并应用于相关药品的质量控制标准中,对于保证药品质量,为药品监管提供技术支撑具有重要意义。本课题根据不同动物的角蛋白氨基酸序列必然存在一定的差异的原理,采用液质联用多肽识别技术和数据处理软件对酶解后的角类样品进行分析处理,找出各类角类样品的特征肽段,并建立了专属性强的角类药材鉴别方法。论文围绕以上思路开展了以下几个方面的研究工作:1.采用液质联用(UPLC-QTOF-MS)、Marker Lnyx数据处理软件,进行主成分分析和因子分析找到羚羊角、水牛角、山羊角、牛角的特征肽段。羚羊角的特征肽m/z 860.7,水牛角特征肽m/z 459.7,山羊角特征肽m/z 673.3,牛角特征肽m/z680.8。2.以得到的各种角的特征肽为母离子,采用高效液相色谱-质谱(QQQ)联用技术,找到各特征离子的MRM检测离子对。羚羊角(m/z860.7→417.0,1081.9),水牛角(m/z459.7→391.9,505.1),山羊角(m/z673.3→764.0,920.0),牛角(m/z680.8→617.1,817.0)。建立一种专属性强的有关角类药材的真伪鉴别方法。3.提出4种角类药材及成药贝羚胶囊的专属性鉴别方法的标准草案。4.提出山羊角冒充羚羊角的补充检验方法标准草案。
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