【摘 要】
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目的:后发性白内障（posterior capsule opacification,PCO）是目前白内障术后最常见的并发症之一,摘除白内障后不可避免的会有部分晶状体上皮细胞（lens epithelial cells,LECs）残留,残留在晶状体囊膜及赤道部的LECs发生增殖、迁移及上皮-间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）是PCO发生、发展的主要
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目的:后发性白内障（posterior capsule opacification,PCO）是目前白内障术后最常见的并发症之一,摘除白内障后不可避免的会有部分晶状体上皮细胞（lens epithelial cells,LECs）残留,残留在晶状体囊膜及赤道部的LECs发生增殖、迁移及上皮-间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）是PCO发生、发展的主要原因。Nd:YAG激光后囊截开术是主要治疗手段,但易出现眼压升高、眼前黑影等并发症。本研究通过测定大鼠PCO模型后囊膜组织中miRNA-124的表达情况,测定miRNA-124过表达的HLE-B3细胞的细胞周期、细胞迁移及凋亡情况以及细胞内与PI3K/AKT/m TOR信号通路有关的PI3K、AKT、m TOR蛋白表达水平,进而明确miRNA-124与PCO的相关性,明确miRNA-124对LECs增殖、迁移及凋亡的影响,及其与PI3K/AKT/m TOR信号通路的关系,以期为PCO的药物治疗提供新的靶点。方法:本课题从动物实验及细胞实验两方面进行研究。1.动物实验:将30只大鼠随机分为5组,制作大鼠PCO动物模型,分别于术后0天、3天、7天、14天、28天行术眼眼前节照相,观察晶状体后囊膜的混浊程度,并在上述每个时间节点分别处死6只大鼠,获取其晶状体后囊膜组织,采用Real-time PCR技术检测不同组大鼠后囊膜组织中LECs内miRNA-124的表达情况。2.细胞实验:采用人晶状体上皮细胞HLE-B3细胞系构建miRNA-124过表达模型,并将细胞分为对照组（NC组）和miRNA-124过表达组（OE组）两组,通过Real-time PCR检测OE组HLE-B3细胞中目的基因miRNA-124表达情况,分别对OE组及NC组HLE-B3细胞进行流式细胞周期、细胞凋亡检测,Transwell实验来比较两组细胞迁移能力,Western blot检测两组细胞PI3K、AKT、m TOR蛋白的表达情况。结果:1.在大鼠PCO模型中miRNA-124表达下调。2.OE组HLE-B3细胞中miRNA-124的表达量显著上调（p＜0.001）;细胞周期检测证实miRNA-124过表达导致G1期细胞比例升高;Transwell实验中,OE组迁移细胞数为（58.3±0.32）个,NC组迁移细胞数为（79.1±2.01）个,提示miRNA-124过表达减弱HLE-B3细胞的迁移能力;细胞凋亡实验中,OE组凋亡细胞所占百分比为（3.72±0.13）%,NC组凋亡细胞所占百分比为（0.78±0.13）%,提示miRNA-124过表达可促进HLE-B3细胞凋亡;Western blot检测OE组中PI3K/AKT/m TOR信号通路相关蛋白PI3K、AKT、m TOR蛋白表达均低于NC组,表明miRNA-124过表达可负向调控PI3K/AKT/m TOR信号通路。结论:在PCO中miRNA-124表达下调,miRNA-124过表达时可减弱LECs的增殖及迁移,促进LECs的凋亡,从而起到抑制PCO发生的作用,这一过程可能与抑制PI3K/AKT/m TOR信号通路活化有关。
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